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缺氧条件下葡萄糖对成年神经干细胞体外增殖影响的研究
目的 探讨不同浓度的葡萄糖对氧/糖剥夺条件下体外成年大鼠神经干细胞活力和增殖的影响. 方法 无血清培养成年Fisher 344大鼠海马神经干细胞系,用Nestin和DAPI免疫荧光双染以确认其生物学特性.将三气培养箱氧气浓度调至1％以制备缺氧环境,将培养基换为无糖Earle's平衡盐溶液缺氧培养6h后更换为含有不同浓度葡萄糖(7.5、17.5、27.75、41.75、83.75 mmol/L)的培养基恢复正常条件继续培养后,检测神经干细胞的活力和形态学改变.同时设置常氧常糖为正常对照组和甘露醇为渗透压对照组. 结果 CCK-8检测显示,常糖常氧正常对照组细胞吸光度值较缺氧模型组高,7.5 mmol/l糖培养组以及41.75 mmol/L和83.75 mmol/L糖培养组吸光度值均较正常糖缺氧组(17.5 mmol/L)低,差异有统计学意义(P＜0.05)；而27.75mmol/L糖培养组吸光度值较正常糖缺氧组低,差异无统计学意义,且排除了高糖培养基引起的渗透压力的影响.各组细胞形态学改变与CCK-8检测结果一致.结论 缺氧后轻度升高的糖对体外缺氧成年神经干细胞的损伤可能有保护作用,而较低浓度和更高浓度的葡萄糖则加重其损伤.
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左旋氨氯地平对成年大鼠神经干细胞氧/糖剥夺损伤的保护作用
目的 研究左旋氨氯地乎对成年大鼠神经干细胞氧/糖剥夺(OGD)损伤后细胞生长活力、增殖和凋亡情况的影响,探讨左旋氨氯地平对OGD后成年大鼠神经干细胞的保护作用.方法 制备成年大鼠海马神经干细胞OGD模型,按干预的左旋氨氯地平浓度分为4组:0mol/L组(即无干预对照组)、0.5 μmol/L组、1.0 μmol/L组、5.0 mol/L组.CCK-8法检测不同浓度左旋氨氯地平对OGD后成年大鼠神经干细胞生长活力的影响:Edu荧光染色法观察不同浓度左旋氨氯地平对OGD后成年大鼠神经干细胞增殖的影响:Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测OGD后成年大鼠神经干细胞的凋亡情况. 结果 OGD6 h后成功制备成年大鼠海马神经干细胞OGD模型.与无干预对照组比较,不同浓度左旋氨氯地平干预后成年大鼠海马神经干细胞的生长活力均明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05); 5.0 μmol/L左旋氨氯地平组OGD后神经干细胞增殖率明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05)；1.0 μmol/L和5.0 μmol/L左旋氨氯地平组OGD后神经干细胞中凋亡细胞比例明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 成年大鼠神经干细胞OGD模型中,左旋氨氯地平具有一定的抗OGD损伤的保护作用.
