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慢病毒载体对HIF-2α基因沉默效率的研究
目的 构建有效抑制HIF-2α基因表达的siRNA序列,并找到佳病毒载体浓度.方法 设计针对HIF-2α mRNA作用的4条siRNA的序列,分别插入慢病毒载体中,获得较高滴度的慢病毒后,运用RT-PCR和Werstern blot方法检测HIF-2α mRNA及蛋白质水平,筛选出对HIF-2α基因沉默作用较强的干扰序列及病毒载体剂量.结果 4条siRNA序列均能干扰HIF-2α基因表达,其中KD2序列对HIF-2α基因的干扰作用强(P<0.05).两种不同剂量的慢病毒载体比较,高剂量慢病毒载体的干扰效果更明显(P＜0.05).结论 KD2序列能有效沉默HIF-2α基因;高剂量的慢病毒载体对HIF-2α基因的沉默效果更强.
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青海地区藏族HIF-2α基因单核苷酸多态性与胃癌易感性
目的 探讨青海地区藏族HIF-2α基因单核苷酸多态性与藏族胃癌易感的相关性.方法 收集世居青海的健康藏族62例作对照组、胃癌患者45例作胃癌组.利用血液基因组DNA提取试剂盒提取并纯化被研究者外周血.采用PCR及测序法检测HIF-2α基因的rs13419896、m7598371、m6715787位点,并行相关性分析.结果 rs13419896SNP基因型分别为A/G、G/G、A/A,rs7598371SNP基因型分别为C/G、C/C、G/G,rs6715787SNP基因型分别为C/G、C/C、G/G.对照组检验基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡规律(P＞0.05).其中rs13419896的A/G、G/G、A/A基因型频率在胃癌组中分别为28.89％、28.89％、42.22％,在对照组中的频率为38.71％、27.42％、33.87％.rs7598371的C/G、C/C、G/G基因型频率在胃癌组分别为26.67％、35.56％、37.78％,在对照组分别为41.94％、25.81％、32.26％.rs6715787的C/G、C/C、G/G基因型频率在胃癌组分别为35.56％、40.00％、24.44％,在对照组分别为40.32％,32.26％、27.42％.经x2检验示,胃癌组与对照组间无统计学差异(P＞0.05).结论 青海地区藏族HIF-2α基因单核苷酸多态性与藏族胃癌易感性无关.
