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  • 趋化因子融合蛋白SDF-KDEL慢病毒载体pLenti6/V5-S-K的构建和表达

    作者:孙利;曲晓莉;张久聪;张颖;黄长形;连建奇;魏欣;姜泓;张野;庄严;翟嵩;孙永涛;聂青和;白雪帆

    目的 构建含趋化因子融合蛋白SDF-KDEL的慢病毒载体pLenti6/V5-S-K,为研究Ⅰ型人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染的基因治疗奠定基础.方法 应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增目的 基因片段SDF-KDEL,纯化后的PCR产物定向连接入pLenti6/V5-D-TOPO 载体,构建慢病毒载体pLenti6/V5-S-K,并在293FT细胞中建立慢病毒株,后转染人宫颈癌HeLa细胞观察SDF-1蛋白的表达.结果 成功构建了慢病毒载体pLenti6/V5-S-K,并证实SDF-1蛋白可在HeLa细胞系内表达.结论 慢病毒载体可介导CXC-细胞内趋化因子(CXC-in-trakine,SDF-K)基因高效、稳定转染HeLa细胞,可用于抗HIV-1感染的基因治疗.

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