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蛋白质免疫印迹检测文献资料
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热休克蛋白对短暂心肌缺血所致蛋白质聚集的影响
为了观察短暂心肌缺血后心肌中蛋白质聚集物的产生,探讨热休克蛋白70及αB-晶状体蛋白对心肌中蛋白质聚集物的影响,采用雄性Wistar大鼠制备在体心缺血-再灌注损伤模型,通过乙醇磷钨酸电镜观察蛋白质聚集物产生,采用免疫电镜观察热休克蛋白70及αB-晶状体蛋白对蛋白质聚集物的影响.结果发现:①缺血15 min再灌注30 min时,心肌细胞中开始出现形态不规则的蛋白质聚集物,聚集物主要分布在核周、线粒体周围及其两极.再灌注4 h,蛋白质聚集物达到高峰,24 h后逐渐减少,72 h基本恢复正常.②大鼠经热休克预处理及缺血预适应后, 15 min缺血及4 h或24 h再灌注所致的心肌蛋白质聚集物的产生明显减少,恢复速度加快,再灌注24 h已基本恢复正常.③通过免疫电镜观察,在假手术对照组,心肌中热休克蛋白70表达水平很低.大鼠经热休克预处理后,心肌中热休克蛋白70表达增多,经缺血15 min再灌注4 h后,热休克蛋白70与心肌中蛋白质聚集物共分布.在假手术对照组心肌中,αB-晶状体蛋白有一定量的组成型表达,并均匀分布于胞浆之中.经热休克预处理、缺血预适应后缺血15 min再灌注4 h心肌中,αB-晶状体蛋白向肌丝移位,主要位于Z线两侧的明带,且与蛋白质聚集物共分布.本研究首次揭示了缺血-再灌注损伤时心肌细胞中蛋白质聚集物的形成、空间分布及其动态变化规律;证实了热休克预处理及心肌缺血预适应可明显减轻缺血-再灌注所致心肌蛋白质聚集.
