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三氯乙酸/丙酮沉淀法文献资料
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大鼠皮质双向电泳样品制备方法的优化
目的优化大鼠皮质双向电泳样品制备方法,初步建立双向电泳条件,提高电泳分辨率和重复性.方法分别应用三氯乙酸/丙酮沉淀法、超速离心法及改良超速离心法制备电泳样品,并比较各处理方法对电泳的影响.改良超速离心法即将混合了匀浆液Ⅱ的匀浆物4 C放置过夜后再进行后续处理.结果改良超速离心法所制备的电泳样品,不仅可以减少蛋白的降解,还可以增加蛋白的溶解性,从而获得分辨率较高、重复性较好的双向电泳图谱.结论改良超速离心法更适于制备来源于中枢神经系统双向电泳样品.
关键词： 皮质 双向电泳 三氯乙酸/丙酮沉淀法 超速离心法 -
纳升级反相液相色谱串联质谱法分析海马蛋白质组
目的:为了全面了解海龙的蛋白质成分,对其蛋白表达谱进行蛋白质组学分析.方法:应用三氯乙酸/丙酮沉淀法提取海马药材的蛋白质,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离分析,将聚丙烯酰胺凝胶电泳条带切下进行胶内酶解处理后,应用纳升级反相液相色谱串联质谱(nanoRPLC-MS/MS)法系统分析海马提取蛋白质胶内酶解产物,并进行数据库检索鉴定蛋白质.结果:共鉴定到海马蛋白192种,等电点范围为4.06～12.18,相对分子质量范围为3.06×103～3.52×106,多肽10 680个;通过生物信息学方法分析了海马提取蛋白质的分子功能.得到海马提取物中的蛋白质具有结合、酶催化、肌动、ATP酶等功能活性,其中结合活性的蛋白质占的比例较大.结论:本研究建立了海马的蛋白质表迭谱,可为海马药材中蛋白质的深入研究奠定基础,对海马药材有效成分的分析和海马药材鉴别具有重要意义.
