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白癜风搽剂质量标准
目的:建立白癜风搽剂(补骨脂、乌梅、白芷、肉桂)的质量标准.方法:采用TLC法鉴别白癜风搽剂中补骨脂、乌梅、白芷及肉桂;用HPLC法同时对制剂中补骨脂素、异补骨脂素进行含量测定.结果:薄层色谱中,供试品溶液色谱在与对照药材或对照品相应位置上出现相同颜色的斑点.高效液相色谱中,补骨脂素在2.0～101.3 μg·ml-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为99.3%(RSD=0.6%,n=6);异补骨脂素在2.3～114.3 μg·ml-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=5),平均回收率为99.2%(RSD=0.7%,n=6).结论:该含量测定方法简便,快速,精密度高,准确度高,可用于该制剂的质量控制.
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异补骨脂素对体外培养大鼠成骨细胞增殖分化成熟的影响
目的:研究异补骨脂素(Isopsoralen,IP)对体外培养大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖与分化成熟的影响.方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养于含10%FBS的MEM培养液中,3 d后首次换液,铺满90%皿底后传代培养;增殖分析采用96孔板,加入在培养液中终浓度分别为1×10<'-4>、1×10<'-5>、1×10<'-6>、1×10<'-7>mol/L的异补骨脂素,MTT法分析;分化分析采用24孔板,于成骨性诱导培养第3、6、9、12、15天分别测碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)活性、钙含量、骨钙素,第12天进行ALP组织化学染色,第14天进行茜素红染色和钙化结节计数.结果:终浓度为1×10<'-4>mol/L的异补骨脂素对细胞增殖有抑制作用,而1×10<'-5>mol/L浓度虽对ROB增殖无明显影响,但能显著提高细胞ALP活性、增加钙含量、促进骨钙素分泌,并增加钙化结节数量.结论1×10<'-5>mol/L异补骨脂素能促进ROB分化成熟,应为中药补骨脂抗骨质疏松的有效成分.
