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  • 豚鼠耳蜗部分外支持细胞的分离法

    作者:常青;龚树生;丁娟;唐明;Hescheler J

    目的:探讨豚鼠耳蜗部分外支持细胞(Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞)的分离方法,并建立细胞活性的鉴别标准. 方法:选取健康杂色豚鼠5只,解剖出耳蜗基底膜,采用酶解加机械吹打法分离Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞.结果:可以获得较多数量、活性良好、长短不一的Deiter细胞和Hensen细胞,8 h内细胞活性较好;但外柱细胞数量较少,存活时间较短.评价Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞的活性标准:①细胞膜无膨胀或扭曲;②细胞核无肿胀、移位;③在相差显微镜下细胞呈半透明状态,存在双折射现象;④细胞内无呈布朗运动的颗粒.结论:熟悉耳蜗的解剖特性、分离出完整的基底膜,增加酶的浓度和加大机械吹打力度是获取活性良好的Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞的关键;评价外毛细胞活性的4项标准同样可用于判断Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞的活性.

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