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应用双向电泳和免疫印迹技术分析软叶针葵花粉变应原
目的:采用双向电泳和免疫印迹技术对软叶针葵花粉提取液蛋白质组分进行分析,寻找软叶针葵花粉的主要变应原.方法:提取软叶针葵花粉变应原,应用双向电泳(2-DE)结合免疫印迹技术,获得相应的电泳图谱和免疫印迹图谱.结果:软叶针葵花粉蛋白提取液经双向电泳后,用考马斯亮蓝染色,得到的电泳图显示约有601个主要蛋白斑点.分子量(Mr)分布约20~130 kD;等电点(pI)主要集中在4.0~8.0.免疫印迹分析结果显示,阳性组与对照组的差异蛋白点数约为19个.结论:双向电泳联合免疫印迹技术对软叶针葵花粉提取液蛋白质组分分析,可寻找到其主要变应原,并可进一步用于变应原致敏组分的研究.
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软叶针葵花粉疫苗治疗小鼠过敏性鼻炎的效果和机制
目的 建立小鼠过敏性鼻炎模型,用重组软叶针葵花粉profilin疫苗免疫预防治疗,观察过敏性鼻炎小鼠的病理变化,探讨该疫苗对过敏性鼻炎治疗效果及可能机制.方法 用腹腔注射法建立BALB/c小鼠软叶针葵花粉过敏性鼻炎模型,皮下注射过敏原疫苗进行预防治疗.通过小鼠无创肺功能仪检测小鼠治疗前后气道高反应性、间接ELISA检测血清中特异性抗体(IgE和IgG2a)、细胞因子,透射电镜观察鼻黏膜组织超微结构变化.结果 疫苗特异性免疫治疗后,小鼠鼻部症状和气道高反应性减轻,其血清中特异性IgG2a水平升高、IgE水平降低,培养脾细胞上清中INF-γ、IL-1O含量增加,IL-4生成减少.结论 重组软叶针葵花粉profilin作为疫苗对花粉过敏性鼻炎有一定的疗效,可能与促使Th2向Th1转换,调节辅助性T细胞的平衡有关.