首页 > 文献资料
-
长链非编码RNA PVT1对人脑胶质瘤U251细胞增殖能力的影响
目的 探讨长链非编码RNA PVT1 (lncRNA-PVT1)对人脑胶质瘤U251细胞增殖能力的影响.方法 体外培养胶质瘤细胞系U251细胞,分别转染PVT1 siRNA(PVT1组)和negative control siRNA(对照组).PCR法检测lncRNA-PVT1及C-MYCmRNA表达水平,CCK-8法检测细胞增殖能力,Western blot检测C-MYC蛋白表达水平.结果 PVT1组lncRNA-PVT1 mRNA表达水平(0.27±0.08)较对照组(1.0±0.30)明显降低(P＜0.05);PVT1组C-MYC mRNA表达水平(0.87±0.19)与对照组(1.0±0.15)无明显差异(P＞0.05).转染siRNA后1、2、3d,PVT1组U251细胞活力较对照组均明显降低(P＜0.05).PTV1组C-MYC蛋白表达水平(0.29±0.12)较对照组(0.85±0.27)明显降低(P＜0.05).结论 降低lncRNA-PVT1表达水平能够抑制U251细胞增殖,其机制可能与lncRNA-PVT1够影响C-MYC蛋白的表达水平有关.
-
应用siRNA技术抑制产肠毒素大肠杆菌LT 基因表达的研究
目的：应用小干扰RNA（siRNA）技术抑制产肠毒素大肠杆菌（ETEC）LT 基因的表达。方法针对 LT基因设计siRNAs序列，在ETEC培养过程中，将针对LT的siRNA、非特异性对照siRNA、阴性对照siRNA和LB培养基分别加入siRNA组（siRNA‐LT1组、siRNA‐LT2组）、siRNA‐coa3组、siRNA‐NC组和空白对照组，分3个时间点加入，每次1 nmol。在首次加入siRNA后45 min（A时间点）、90 min（B时间点）、135 min（C时间点）留取菌液，应用实时荧光定量PCR检测上述3个时间点5组LT mRNA的表达水平。应用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测siRNA‐LT1组、siRNA‐LT2组和空白对照组在3个时间点的LT蛋白表达水平。结果实时荧光定量PCR结果显示，siRNA‐LT1在A、B、C 3个时间点对LT mRNA表达的抑制率分别为70．9％、70．1％、72．5％，siRNA‐LT2在A、B、C 3个时间点对LT mRNA表达的抑制率分别为70．1％、69．2％、70．5％，siRNA‐LT1组、siRNA‐LT2组对LT mRNA表达的抑制率与相应处理时间的siRNA‐NC组、siRNA‐coa3组、空白对照组比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。Western Blot结果显示，siRNA‐LT1和siRNA‐LT2在A、B、C 3个时间点对LT蛋白表达的抑制率分别为43．1％、18．4％、5．0％和38．2％、15．4％、30．1％。结论针对L T基因设计合成的siRN A在体外能有效地抑制L T 基因的表达。
