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长链非编码RNA MALAT1对神经母细胞瘤系细胞生物学特性的影响
目的 探讨长链非编码RNA MALAT1对神经母细胞瘤系细胞生物学特性的影响及作用机制.方法 体外培养神经母细胞瘤系SHEP2细胞,细胞分为Control、sh-MALAT1、miR-181a-5p inhibitor和sh-MALAT1+ miR-18 1a-5p inhibitor组,其中sh-MALAT1组转染sh-MALAT1,miR-181a-5p inhibitor组转染miR-181a-5p inhibitor,sh-MALAT1+ inhibitor组共同转染sh-MALAT1与miR-181a-5p inhibitor,Control组加入等量空载体.PCR检测mRNA水平;生物信息预测MALAT1与miR-181a-5p的靶向关系,荧光素酶实验鉴定;CCK8法检测细胞增殖能力;Hoechst法检测细胞凋亡;划痕实验测试细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭;免疫印迹法检测蛋白表达.结果 sh-MALAT1明显降低MALAT1并提高miR-181a-5p在神经母细胞瘤细胞系SHEP2细胞mRNA水平.miR-181 a-5p mimic明显降低MALAT1 wt荧光素酶活性.sh-MALAT1抑制SHEP2细胞增殖、侵袭及迁移,促进细胞凋亡;miR-181 a-5p inhibitor促进细胞增殖、侵袭及迁移,抑制细胞凋亡,并减弱sh-MALAT1产生的影响.同时,sh-MALAT1抑制PI3K/Akt信号通路,而miR-181a-5p inhibitor可激活此信号通路并减弱sh-MALAT1的抑制作用.结论 MALAT1靶向下调miR-181a-5p表达促进神经母细胞瘤细胞系SHEP2细胞增殖、迁移和侵袭.
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长链非编码RNA MALAT1对胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭的影响及其机制
目的:探讨长链非编码RNA MALAT1(long non-coding RNA MALAT1,lncRNA MALAT1)对胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭的影响及其机制.方法:采用实时定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测胶质母细胞瘤细胞系LN-229,U87,A172,U373和正常人脑胶质细胞系HEB中lncRNA MALAT1的表达.将LN-229细胞系分成MALAT1组与对照组(EV组),采用Lipofectamine TM2000分别转染pcDNA3.1-lncRNA-MALAT1质粒和阴性对照质粒pcDNA3.1.CCK-8法测定细胞增殖能力,Transwell试验测定侵袭能力,Western印迹法测定基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)和pERK1/2蛋白的表达.结果:LncRNAMALAT1在胶质母细胞瘤细胞系LN-229,U87,A172,U373中的相对表达量低于正常人脑胶质细胞系HEB.转染后0,24,48 h,MALAT1组与EV组450 nm光密度值(OD450nm)差异无统计学意义(P＞0.05);转染后72,96h,MALAT1组OD450nm值低于EV组,差异有统计学意义(P＜0.05).MALAT1组侵袭细胞数为95.8±9.1,显著少于EV组(185.3±13.9),差异有统计学意义(P＜0.05).MALAT1组MMP-2蛋白相对表达量低于EV组(P＜0.05);MALAT1组pERK1/2蛋白相对表达量低于EV组(P＜0.05).结论:LncRNA MALAT1在胶质母细胞瘤中下调表达,过表达lncRNAMALAT1可抑制胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭,其机制可能与MMP-2及pERK1/2蛋白下调表达有关.
关键词： 胶质母细胞瘤 增殖 侵袭 长链非编码RNA MALAT1
