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胞嘧啶脱氨酶:尿嘧啶磷酸核糖转移酶/5-氟胞嘧啶文献资料
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以超声微泡为载体的胞嘧啶脱氨酶:尿嘧啶磷酸核糖转移酶融合自杀基因在食管癌细胞株EC9706中的表达
目的 观察超声微泡(UM)介导的胞嘧啶脱氨酶:尿嘧啶磷酸核糖转移酶/5-氟胞嘧啶(CD:UPRT/5-FC)自杀基因系统对人食管癌细胞株EC9706的转染效率和对细胞活力的影响.方法 将EC9706细胞按1×108/L接种于12孔孔板中,随机分为4组:A组:空白对照组;B组:单纯质粒组;C组:单纯超声微泡组;D组:超声微泡+质粒组.24 h后在荧光显微镜下观察各组细胞绿色荧光蛋白的表达,流式细胞术(FCM)检测各组的转染效率,Western blot法检测各组细胞CD基因的表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测5-氟胞嘧啶(5-FC)对转染后细胞的杀伤作用.结果 (1)D组细胞中的绿色荧光强度明显高于其他各组,FCM检测各组转染成功率分别为0％、1.42％、0％、32.60％,超声微泡介导的转染对EC9706细胞活性无明显影响(P＞0.05);(2)Western blot结果显示D组细胞CD基因蛋白条带灰度值明显高于其他各组(P＜0.05);(3)5-FC对转染后的肿瘤细胞有明显的杀伤作用,细胞存活率明显下降.结论 采用超声微泡携带CD:UPRT融合自杀基因可显著提高在食管癌细胞中的转染效率,增强5-FC对肿瘤细胞的杀伤作用.
