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特异性小片段干扰RNA降低人源性长寿保障基因2/肿瘤转移抑制基因-1表达对人前列腺癌细胞株侵袭转移能力的影响
目的 观察人源性长寿保障基因2(LASS2)/肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1)对人前列腺癌细胞株侵袭转移能力的影响.方法 首先采用小片段RNA干扰技术沉默人前列腺癌细胞株PC-3M-2B4(低转移潜能)中LASS2/TMSG-1的表达,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术、免疫细胞化学法筛选干扰效率高的小干扰RNA (siRNA)后,选取干扰效率高的siRNA-2进行后续实验,通过体外侵袭实验、细胞划痕实验及黏附实验检测干扰LASS2/TMSG-1基因前后,PC-3M-2B4细胞侵袭转移能力的改变.结果 筛选出4条siRNA,以空白对照为1,siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及siRNA-4的LASS2/TMSG-1 mRNA表达量分别为1.557、0.155、0.369及0.193;siRNA-2转染组穿膜细胞数为(21.20±1.21)个,细胞的侵袭能力明显高于无关阴性对照组[(l0.07±1.39)个]和空白对照组[(11.00±1.97)个,P＜0.01];siRNA-2转染组细胞划痕修复率[(64.90±0.56)％]明显高于无关阴性对照组[(26.46±0.31)％]和空白对照组[(22.18±0.57)％],差异有统计学意义(P＜0.01);细胞黏附30、60 min后,与无关阴性对照组[(29.83±0.15)％、(49.90±0.35)％]、空白对照组[(30.37±1.27)％、(50.20±0.06)％]比较,siRNA-2转染组细胞黏附率[(10.10±0.27)％、(30.37±0.30)％]明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 通过RNA干扰技术证实了LASS2/TMSG-1在肿瘤侵袭转移中的作用,证明它是一种肿瘤转移抑制基因.
关键词： 前列腺癌 人源性长寿保障基因2/肿瘤转移抑制基因-1 侵袭 转移
