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马鞍山市金黄色葡萄球菌鉴定及SPA基因多态性分析
目的 鉴定分离自马鞍山的金黄色葡萄球菌,探索使用金黄色葡萄球菌SPA基因对菌株进行多态性分析.方法 采集马鞍山市食品、食物中毒和腹泻患者标本,按照GB/4789.10-2003和WS/T80-1996进行金黄色葡萄球菌的分离培养.对分离的菌株,用过氧化氢酶和血浆凝固酶试验后,用生化实验对菌株进行鉴定.提取鉴定为金黄色葡萄球菌的DNA作为模板,PCR扩增菌株的SPA蛋白X区域并测序,测序结果提交数据库（http://www.seqnet.org/）进行分型,采用分型软件Ridom Staph Type对分型结果进行聚类分析.结果 共分离和鉴定54株金黄色葡萄球菌,其中食品、食物中毒和腹泻标本分别为36株、11株和7株.所有菌株的过氧化氢酶及血浆凝固酶均为阳性,生化实验鉴定为金黄色葡萄球菌.54株菌株可分成19个型,分别为t 189型11株、t 701型9株、t091型7株、t 1376型5株、t011型、t 127型各2株、t 084型、t 163型、t 459型、t 547型、t 548型、t 791型、t 954型、t 1544型、t 4336型、t5269型、t5353型各1株,同时发现2个新型,分别为t5269和t5353型.两起食物中毒的型别分别为t 189型和t 701型.结论 SPA基因分型方法具有快速、易于标准化的特点,可用于食物中毒的流行病溯源.
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金黄色葡萄球菌胶乳凝集试验及spa基因序列改变与万古霉素耐药关系探讨
目的 研究金黄色葡萄球菌(金葡菌)胶乳凝集试验及spa基因序列改变与万古霉素耐药的关系.方法 检测体外诱导对万古霉素耐药金葡菌过程中的金葡菌胶乳凝集试验结果改变情况,并利用单链构象多态性(SSCP)技术及DNA测序分析金葡菌spa基因序列有无改变.结果 3株对万古霉素产生中介耐药的金葡菌在诱导过程中胶乳凝集试验发生改变,其中2株金葡菌spa基因序列有改变.结论 spa基因碱基序列的改变,可能与金葡菌对万古霉素耐药有一定关联.
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异质性万古霉素中介的金黄色葡萄球菌的分子特征
目的 了解我院异质性万古霉素中介的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分布及分子学特征.方法 对2015年10月至2016年5月我院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,采用菌群分析策略-曲线下面积法(PAP-AUC)筛选异质性万古霉素中介的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;采用多重PCR法对hVISA进行agr、spa、SCC基因分型测定,对PCR产物进行测序确定spa分型.结果 分离的79株MRSA经筛选获得9株hVISA;9株hVISA中有7株为agr-Ⅰ型,2株为agr-Ⅲ型;有6种spa克隆型,包括t437(4株),t114(1株)、t2310(1株)、t14062(1株)、t030(1株)、t16472(1株).SCCmec分型以Ⅳa型为主,占55.56%,其次为Ⅲ型33.33%、Ⅱ型11.11%.结论 我院hVISA检出率为11.39%,呈多克隆流行.
