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子痫前期患者胎盘组织中DLX3和Syncytin的表达
目的:探讨子痫前期患者胎盘组织中DLX3和Syncytin的表达及意义.方法:选取子痫前期患者60例 (其中轻度子痫前期患者30例、重度子痫前期患者30例),正常妊娠妇女30例作为对照,在终止妊娠前3 d内应用彩色多普勒超声检测胎儿脐动脉血流S/D值与胎头双顶径,并且分别采用RT-PCR和ELISA检测胎盘组织中DLX3和Syncytin mRNA、蛋白的表达.结果:①轻、重度子痫前期组DLX3及Syncytin mRNA的表达均明显低于对照组,且重度子痫前期组低于轻度子痫前期组 (F=694.115、546.194,P＜0.05).②轻、重度子痫前期组DLX3及Syncytin蛋白的表达均明显低于对照组,且重度子痫前期组低于轻度子痫前期组 (F=129.315、62.317,P＜0.05).③轻、重度子痫前期组中DLX3和Syncytin的表达均呈正相关(mRNA:r=0.429、0.513;蛋白:r=0.579、0.677,P＜0.05).④轻度子痫前期组DLX3和Syncytin蛋白的表达与胎儿脐动脉血流S/D值均呈负相关(r=-0.324和-0.352,P＜0.05),与胎头双顶径呈正相关(r= 0.431和 0.510,P＜0.05).重度子痫前期组DLX3和Syncytin蛋白的表达与胎儿脐动脉血流S/D值均呈负相关(r=-0.624和-0.637,P＜0.05),与胎头双顶径呈正相关(r=0.536和 0.617,P＜0.05).结论:DLX3和Syncytin在子痫前期的发病及疾病进展过程中起一定作用.
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pFlag-dlx3载体的构建及在iMDP3中的表达
目的 构建真核表达载体pFlag-dlx3,并将其转染成牙本质样细胞株iMDP3,检测外源dlx3基因在iMDP3细胞内的表达.方法 提取新生小鼠牙髓总RNA,RT-PCR扩增Dlx3目的基因片段,并将该片段克隆至PCR-TopoⅡ载体中;经鉴定正确后目的基因与表达载体pFlag-CMV连接;Lipofectamin 2000介导重组质粒pFlag-dlx3转染iMDP3;Western-blot鉴定外源性dlx3在细胞内的表达.结果 重组pFlag-dlx3质粒经酶切、测序鉴定正确;iMDP3细胞内检测到外源dlx3蛋白的表达;转染pFlag-dlx3组dlx3蛋白的表达量显著高于正常组.结论 成功构建真核表达载体pFlag-dlx3,且外源dlx3基因可在iMDP3细胞内过表达.
