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DNA损伤诱导蛋白2文献资料
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糖基转移酶抑制剂诱导原代肝细胞损伤中DNA损伤诱导蛋白DDI2 mRNA表达的研究
目的 研究糖基转移酶抑制剂对原代培养大鼠肝细胞损伤中DNA损伤诱导蛋白2(DNA-damage inducible protein 2,DDI2)在mRNA水平表达的影响.方法 原位胶原酶灌流法分离纯化大鼠原代肝细胞并培养,并用O-糖基化修饰抑制剂苄基-2-乙酰胺基-2-脱氧-α-D-吡喃半乳糖苷(Benzyl-α-GalNAc)及N-糖基化修饰抑制剂衣霉素(tunicamycin,TM)处理细胞,Real time-PCR法测定DDI2 mRNA表达水平.结果 衣霉素处理后的原代培养肝细胞DDI2表达上调,而Benzyl-α-GalNAc处理后的原代培养细胞DDI2表达有所下调.结论 衣霉素及Benzyl-α-GalNAc在转录水平上分别上调和下调大鼠原代肝细胞DDI2的表达,从而参与肝细胞损伤的调节.
关键词： 糖基转移酶抑制剂 DNA损伤诱导蛋白2 原代肝细胞 mRNA表达 肝细胞损伤 -
肝细胞DNA损伤诱导蛋白DDI2的单克隆抗体制备及鉴定
目的 制备鼠抗DDI2蛋白单克隆抗体,并对其在细胞和组织中的定位进行初步研究.方法 利用体外原核表达的DDI2蛋白,免疫BLAB/c小鼠,制备单克隆抗体.利用免疫组织化学技术明确该蛋白在组织中的定位.结果 利用杂交瘤细胞技术,成功制备了两株DDI2单克隆抗体细胞系2H3、2B2.表达纯化的单克隆抗体具有较高的免疫活性.与正常对照组相比,肝损伤组织中该蛋白表达增强,且高表达于门脉周围肝实质细胞,并主要表达于细胞核.结论 DDI2的表达与四氯化碳诱导的肝损伤有关,损伤肝细胞主要表达于肝实质细胞的细胞核.
