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利格列汀对体外高糖诱导后人肾小管上皮细胞E-cadherin、α-SMA表达的影响及机制
目的:探讨利格列汀对体外高糖诱导后人肾小管上皮细胞钙黏附蛋白E(E-cadherin)、肌动蛋白α(α-SMA)表达的影响及机制。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)随机分为正常对照组、高糖组、高糖+Wnt4 siRNA组、高糖+β-catenin siRNA组、高糖+利格列汀组,高糖+Wnt4 siRNA组、高糖+β-catenin siRNA组分别转染siRNA沉默Wnt4、β-catenin,12 h后与高糖组、高糖+利格列汀组同时加入D-葡萄糖(葡萄糖终浓度为30 mmol/L),高糖+利格列汀组同时加入利格列汀(终浓度10μmol/L),继续培养48 h。采用Western blotting法检测各组E-cadherin、α-SMA、Wnt4、β-catenin蛋白表达,倒置显微镜观察细胞形态学改变,测定细胞长与宽比值。结果与正常对照组比较,高糖组E-cadherin表达下调、α-SMA、Wnt4、β-catenin表达上调(P均<0.05);与高糖组比较,高糖+Wnt4 siRNA组、高糖+β-catenin siRNA组、高糖+利格列汀组E-cadherin表达上调、α-SMA表达下调(P均<0.05)。高糖组细胞由卵圆形伸长呈梭形,高糖+利格列汀组细胞由卵圆形向梭形改变程度减轻。高糖组细胞长/宽较正常对照组、高糖+利格列汀组升高(P均<0.05)。结论利格列汀可部分抑制体外高糖诱导的人肾小管上皮细胞E-cadherin表达下调、α-SMA表达上调,其机制可能与Wnt4/β-catenin通路有关。