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  • 改良的玻璃化液冻存乳鼠卵巢异体原位移植后生殖功能的恢复

    作者:王红燕;王燕蓉;徐仙;赵君利;哈灵侠;贾韶彤;刘春莲

    目的:探讨一种改良的玻璃化液冻存乳鼠卵巢,复苏后进行异体原位移植,评价其对卵母细胞成熟、受精及胚胎发育潜能的影响。方法乳鼠卵巢进行ED20和改良的EG5.5/30液玻璃化冻存,复苏后的乳鼠卵巢一部分酶解消化,通过荧光活力检测卵子的存活率;激光共聚焦显微镜观察α-tubulin的免疫荧光检测卵子内细胞骨架的变化。一部分乳鼠卵巢进行成年去势雌鼠的原位移植。标本随机分为新鲜组和新鲜移植组;ED20液冷冻组和ED20液冻融移植组;EG5.5/30液冷冻组和EG5.5/30冻融移植组。术后15 d,受体鼠同雄鼠合笼,统计移植6个月内的产仔情况;术后6个月,检测恢复动情周期的受体鼠雌二醇(E2)水平。结果玻璃化冻融乳鼠卵巢后, ED20液冷冻组和EG5.5/30液冷冻组卵子存活率(87.0%,84.6%)低于新鲜组(92.6%)(P<0.05);冻融后卵子内微丝和微管结构受损,荧光强度均低于新鲜组(P<0.05);接受冻融卵巢原位移植的受体鼠可以实现自然产仔,但两冷冻液冻融移植组首窝产仔时间、平均每窝产仔数、产仔总数均较新鲜移植组差异有统计学意义(P<0.05)。结论改良的EG5.5/30液冻存幼鼠卵巢复苏后异体原位移植同ED20液效果相似,受体鼠可诞生正常子代,但是生殖储备和生育力明显下降。

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