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哌立福辛联合顺铂对卵巢透明细胞癌ES2细胞系凋亡及Caspase-3和PARP表达的影响
目的：：探讨哌立福辛( perifosine )与顺铂( cisplatin )联合对人卵巢透明细胞癌ES2细胞系凋亡及Caspase-3和PARP表达的影响。方法：以不同浓度(0、2、4、6、8和10μmol/L)哌立福辛作用于人卵巢透明细胞癌ES2细胞系48h。 CCK-8法检测细胞增殖抑制情况。以哌立福辛小有作用剂量与不同浓度(0、10、40、70和100μmol/L)顺铂联合处理细胞48h,以金氏公式筛选出协同抑制作用明显的联合剂量,以该联合剂量处理ES2细胞48h后,DAPI染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡情况；用Giemsa染色检测细胞有丝分裂指数；Western blot法检测细胞中Caspase-3(cleaved)及PARP(cleaved)蛋白的表达情况。结果：CCK-8法检测提示,哌立福辛作用48 h时对ES2细胞的小作用剂量为4μmol/L。金氏公式计算结果提示,4μmol/L哌立福辛+40μmol/L顺铂联合用药协同抑制细胞增殖作用强(q=1.21)；与哌立福辛或顺铂单独作用相比,DAPI染色发现联合用药组镜下可见大量的核碎裂及凋亡小体；流式细胞仪检测发现,联合用药能协同增加细胞凋亡率(q=1.32,P<0.01)。 Giemsa染色结果显示,联合用药能协同抑制细胞有丝分裂(P<0.01)。 Western blot检测发现,联合用药能明显增加细胞中Caspase-3(cleaved)蛋白的表达,降低PARP( cleaved)蛋白的表达。结论：哌立福辛与顺铂联合能协同通过增加Caspase-3( cleaved )蛋白表达及降低PARP ( cleaved )蛋白表达,促进人卵巢透明细胞癌ES2细胞发生凋亡。
