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SIRT1/NF-κB信号通路文献资料
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三七皂苷对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞保护作用及其机制研究
[目的]从氧化应激及炎症角度观察三七皂苷（panax nologinoside，PNS）对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞（rat mesangial cell，RMC）保护作用及从SIRT1/NF-κB信号通路探讨其机制。[方法]培养RMC，并将其分为4组：正常对照组、高糖组、PNS组及SIRT1RNAi+PNS组；采用MTT及Annexin V-FITC分别检测细胞活力及凋亡情况；采用Real-time PCR技术检测RMC SIRT1、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1, TGF-β1）的mRNA表达；Western Blot技术检测SIRT1和乙酰化NF-κB P65蛋白的表达；采用经典的氮蓝四唑(NBT)显色法检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性；ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α、TGF-β1、丙二醛（malondialde－hyde, MDA）等的浓度。[结果]与正常对照组比较，高糖刺激使RMC活力降低，细胞凋亡增加，SOD活性降低，MDA含量增加，SIRT1基因及蛋白表达降低，NF-κB P65蛋白乙酰化水平增高，TNF-α、TGF-β1的mRNA和蛋白水平增高。PNS干预可逆转高糖引起的上述变化，但沉默SIRT1基因后，PNS干预作用不明显。[结论]PNS对高糖诱导的RMC具有保护作用，其机制可能通过增加SIRT1表达及活性，降低NF-κB P65蛋白乙酰化水平，使其转录活性降低，进而抑制炎症及氧化应激。
