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  • APE1和Ki67蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

    作者:郭云娣;张雅琴;白光辉

    目的 研究脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶(APE1)和细胞增殖抗原标记物Ki67蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义.方法 选取未经术前放、化疗的胃癌标本99例,用免疫组织化学EnVision法检测两组APE1和Ki67基因的表达,分析其与胃癌临床病理特征的关系.结果 胃癌组织APE1和Ki67蛋白的阳性表达率分别为63.6%(63/99)和64.6%(64/99);APE1和Ki67蛋白的阳性表达率与胃癌组织淋巴结转移均密切相关(P<0.05);APE1的表达亦与胃癌组织浸润深度相关(P<0.05);胃癌组织中APE1和Ki67蛋白两者的表达呈正相关(r=0.319,P<0.01).结论 APE1可能是预测胃癌组织浸润、转移有用的指标;联合检测APE1和Ki67蛋白可作为判断胃癌预后和筛选高危转移患者的有效指标.

  • 双功能基因APE1调控人骨肉瘤HOS细胞miRNAs的初步研究

    作者:戴楠;李梦侠;卿毅;李崇义;杨宇馨;代晓燕;王东

    目的 比较APE1-konckdown骨肉瘤HOS细胞miRNAs表达谱的差异,初步探讨APE1可能调控的miRNAs及其涉及的功能通路.方法 利用Ad5/F35-APE1 siRNA腺病毒敲低骨肉瘤HOS细胞中APE1的表达,采用miRNA芯片检测敲低组和对照组miRNAs表达谱的改变,qRT-PCR验证,并利用生物信息学分析差异miRNAs涉及的功能.结果 miRNAs芯片结果显示,APE1敲低组中有32个miRNAs表达显著改变;qRT-PCR验证有13个miRNAs的改变与芯片结果趋势一致,其中7个上调,6个下调;基因聚类分析发现,13个显著变化的miRNAs涉及的靶基因的功能主要定位在细胞内,与蛋白、DNA结合以及转录功能有关,参与调控发育和细胞代谢等生物过程;Pathway分析显示其靶基因主要涉及粘附连接、轴突导向、ECM-受体相互作用、肿瘤通路,以及TGF-β、MAPK、ErbB、Wnt、mTOR及p53等关键的细胞信号通路.结论 APE1能直接影响骨肉瘤细胞miRNAs的表达;生物信息学分析表明APE1通过调控miRNAs可能影响下游靶基因的表达,参与肿瘤发生、细胞生存、增殖、粘附等生物学过程和多个信号通路,与骨肉瘤的发生、发展、侵袭转移密切相关.

  • 基于远红外荧光标记的脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶活性检测方法的建立

    作者:程燚;王东;李梦侠

    目的 建立远红外荧光标记的脱嘌呤脱嘧啶(apurinic/apyrimidinic,AP)核酸内切酶活性检测方法.方法 通过5'标记远红外荧光基团(IR700)合成得到AP核酸内切酶活性检测底物,并通过与经典的同位素法对比,检验此方法的可靠性、灵敏度及实用性.结果 远红外荧光标记法较传统的同位素法检测AP核酸内切酶更为敏感(10%上升到30%),且操作时间从传统的1d缩减至2h.结论 远红外荧光标记法检测AP核酸内切酶活性更敏感,且操作方便、无放射性污染,易于推广.

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