首页 > 文献资料
-
环孢素A联合苯基棕榈酰胺吗啡丙醇对K562/AO2细胞GCS基因表达的影响及对逆转多药耐药
目的 研究环孢素A(CsA)和苯基棕榈酰胺吗啡丙醇(PPMP)联合应用对人白血病多药耐药细胞株K562/AO2的葡萄糖神经酰胺合酶(GCS)基因表达的影响及对白血病多药耐药的逆转作用,探索逆转白血病细胞耐药的策略.方法 应用Alamar BlueTM多功能细胞染色法测定阿霉素(ADR)对K562和K562/AO2细胞的半数抑制浓度(IC50)及判断CSA的非细胞毒性剂量;采用RT-PCR法检测GCS基因和mdr1基因的mRNA表达.结果 CsA浓度低于4.5μg/ml对K562/AO2细胞无细胞毒性.ADR对K562和K562/AO2细胞的IC50分别为(0.84±0.04)μg/ml和(89.24±1.27)μg/ml;当1μg/ml CsA和25μmol/L PPMP单用或联合作用于K562/AO2细胞时,ADR的IC50分别为(7.81±0.74)、(17.49±0.53)、(2.82±0.07)μg/ml;而低浓度CsA(0.01μg/ml)和PPMP(10 μmol/1)联合作用时IC50为(16.08±1.25)μg/ml.CsA联合PPMP可明显降低GCS基因的mRNA表达,低浓度CsA和PPMP联用也有此作用.结论 CsA联合PPMP可通过抑制K562/AO2细胞的GCS基因mRNA表达有效逆转其耐药,低浓度CsA联合PPMP在逆转其耐药的同时降低了细胞毒性.
-
GCS通过影响凋亡相关基因致白血病细胞耐药的分子病理机制探讨
目的 通过研究苯基棕榈酰胺吗啡丙醇(PPMP)和小干扰RNA(siRNA)对白血病多药耐药细胞K562/AO2葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基闪的调节及对凋亡相关基因的影响,以探讨GCS基因致白血病多药耐药的分子病理机制.方法 应用体外细胞培养技术和RNA干扰技术观察GCS特异性的化学抑制剂PPMP及针对GCS的siRNA对K562/AO2细胞GCS基因的抑制作用,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析GCS基因被抑制前后K562/AO2细胞中GCS摹因、Bcl-2基因、Bax基因的表达水平及差异.结果 PPMP和siRNA可抑制K562/AO2细胞GCS mRNA的表达,同时致相应细胞的Bcl-2基因表达下降,Bax基因则无明显变化.结论 GCS可能是通过Bcl-2信号转导途径使细胞的抗凋亡能力增强,从而导致白血病细胞的多药耐药.
关键词： 葡萄糖神经酰胺合成酶 苯基棕榈酰胺吗啡丙醇 小干扰RNA 白血病 细胞凋亡 RT-PCR -
PPMP对人白血病多药耐药细胞凋亡相关基因的影响
目的 研究苯基棕榈酰胺吗啡丙醇( PPMP)对人红白血病多药耐药细胞K562/AO2葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基因的调节及对凋亡相关基因的影响.方法 应用体外细胞培养技术观察GCS特异性化学抑制剂PPMP对K562/AO2细胞GCS基因的抑制作用,采用RT-PCR技术分析GCS基因被抑制前后K562/AO2细胞中GCS、B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)基因的表达.结果 PPMP可抑制K562/AO2细胞GCS mRNA的表达,同时致相应细胞的Bcl-2基因表达下降;但Bax基因则无明显变化.结论 GCS可能是通过Bcl-2信号转导途径使细胞的抗凋亡能力增强,从而导致白血病细胞的多药耐药.
-
多药耐药白血病细胞中GCS基因高表达及其意义
目的 探讨葡萄糖神经酰胺合酶(GCS)基因在细胞株K562/AO2和K562中的表达与白血病多药耐药(MDR)的关系.方法 RT-PCR技术检测K562/AO2及K562细胞株的GKS和Bcl-2基因的表达;ELISA法检测两细胞株中Bcl-2及Caspase-3的表达;Alamar BlueTM细胞染色法分析K562/AO2细胞经苯基棕榈酰胺吗啡丙醇(PPMP)处理后多药耐药件的变化.结果 K562/AO2细胞的GCS基因、Bel-2基因和Bel-2蛋白表达明显强于K562细胞(P<0.01),Caspase-3则相反(P<0.05).K562/AO2细胞经25μmol/L PPMP处理后,GCS基因表达抑制,阿霉素(ADR)对其半数抑制浓度(IC50)明显降低.结论 GCS基因可能在白血病MDR形成过程中起着重要作用,其机制可能为细胞凋亡相关基因的表达异常.PPMP通过抑制GCS活性有效逆转K562/AO2细胞的多药耐药性.
关键词： 葡萄糖神经酰胺合酶基因 白血病细胞株 多药耐药 苯基棕榈酰胺吗啡丙醇
