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t(6;11)(p21;q12)/TFEB基因融合相关性肾细胞癌1例
t(6;11) (p21;q12)/TFEB基因融合相关性肾细胞癌[renal cell carcinoma associated with t(6;11)(p21;q12),以下简称TFEB基因融合肾细胞癌]是一种发生于儿童和年轻人的临床上非常少见的低度恶性肿瘤,很少发生转移和复发,发病率远低于同一家族的TFE3基因融合肾细胞癌,两者均为小眼畸形转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MiTF)家族转位肾细胞癌[1],前者至今文献公开报道不足60例.该肿瘤是由位于11q12的非蛋白编码基因Alpha(MALAT1)与6P21的TFEB基因相互融合形成Alpha-TFEB融合基因所致[2].为提高对此类肾癌的认识及诊治水平,回顾性分析我院收治的1例TFEB基因融合肾细胞癌的临床病理特征,现报告如下.
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小鼠TFEB基因重组腺相关病毒的构建及鉴定
目的 构建小鼠TFEB基因的重组8型腺相关病毒(AAV8),并通过感染293细胞观察TFEB表达情况.方法 将pUC57-mTFEB及载体质粒分别进行酶切、连接、转化,得到重组质粒pAAV-CMV-mTFEB,并进行PCR鉴定及测序;将鉴定正确重组质粒,进行AAV8病毒载体包装;正确包装病毒载体后,感染293细胞,通过Western blot观察TFEB基因在293细胞表达情况.结果 酶切鉴定和测序结果证明了pAAV-CMV-mTFEB病毒包装成功;病毒滴度4.65×1012vg/mL;细胞实验提示相比对照组,实验组TFEB基因表达水平升高6倍余(P<0.01).结论 rAAV2/8-CMV-mTFEB构建及包装成功,并可以有效感染和表达.