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  • 量子点标记链酶亲合素-生物素系统用于抗核抗体检测的对比研究与评价

    作者:张晶;虞伟;夏海萍;李晓军;张宇;顾宁

    目的 对比研究不同颜色量子点(QDs)标记链霉亲合素(SA)-生物素系统在抗核抗体(ANA)间接免疫荧光实验(IIFA)检测中的效果,评价其在临床样本检测中的应用价值.方法 Hep-2细胞为抗原片,分别以QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA结合生物素化羊抗人IgG(生物素化二抗),用IIFA检测临床样本血清ANA,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记二抗(FITC-二-抗)为对照.比较和评价3种QDs-SA的应用效果.结果 对114例患者血清研究发现,QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA结合生物素二抗检测可见与FITC-二抗检测ANA结果相同或类似的荧光模式,阳性结果符合率均为100%,平均抗体滴度均高于FITC-二抗标记检测结果(P<0.01).尤其对核仁型、核均质型与核点型ANA荧光模式检测效果优于FITC--抗结果.相关分析结果显示:QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA与FITC-二抗标记ANA定性结果高度一致(Kappa=0.979),滴度均呈高度正相关(P均<0.01).结论 QDs-SA用于IIFA法检测ANA总体结果稳定、灵敏、可行,可获得较FITC-二抗检测更加敏感和稳定的实验结果.

  • 儿童抗核抗体不同稀释度检测结果分析

    作者:庞舒尹;陈奕豪;刘海英;陈曲波;蔡莉;彭小芳;高飞;代玉梅;刘云锋

    目的:比较不同血清稀释滴度对儿童抗核抗体间接免疫荧光分析(A N A‐IIF )结果的影响,探讨降低血清起始稀释度必要性。方法以间接免疫荧光法检测110例健康儿童系列稀释度血清标本抗核抗体(ANA ),并与特异性 ANA 线性免疫(ANA‐LIA)结果相比较;同时分析一组ANA‐IIF阴性的临床患儿标本ANA‐LIA结果。结果健康组标本随着稀释度从1∶80、1∶40、1∶20逐步减低,ANA‐IIF阳性检出率有所上升,分别为7.3%、9.1%、10.9%,但差异无统计学意义(P>0.05),弱阳性分别为7.3%、15.5%、31.8%,差异有统计学意义(P<0.01)。110例健康体检儿童中8例标本检测出特异性ANA,阳性率为7.3%。8例IIF法稀释度1∶80阳性者中,特异性ANA阳性者2例;稀释度1∶40、1∶20新增的4例荧光ANA阳性标本中,有1例特异性ANA阳性。若视ANA‐IIF(1∶80)或ANA‐LIA任一阳性为ANA阳性,ANA阳性率从7.3%上升到12.7%。29例ANA‐IIF(1∶80)为阴性的自身免疫肝病相关自身抗体检测患儿临床标本中,特异性ANA‐LIA检测出5例阳性(17.2%)。结论降低儿童血清起始滴度并不能明显提高ANA‐IIF阳性检出率,反而增加了非特异的弱阳性,因此,临床实验室不需改变儿童ANA常规标本稀释滴度,联合特异性ANA‐LIA的检测有利于ANA的发现。

  • 应用流式细胞术检测抗核抗体

    作者:邢艳;唐中;周京国;袁国华;蒋红

    目的建立流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)的方法.方法收集经间接免疫荧光法(indirect immunofluorescent assay,IIF)测定的55例血清标本作为检测对象,36例健康体检者血清作为阴性对照,采用提取的Hela细胞核作为靶抗原,对所有血清标本进行FCM分析.结果将阳性细胞百分率大于12%的标本定为ANA阳性.IFA和FCM两种方法阴性和阳性的总符合率为92.7%(51/55),FCM测定值随着ANA滴度的增高而增高,并大部分集中于某一个范围.结论 FCM分析法具有省时、客观、可定量分析的特点,是ANA检测的一种新方法.

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