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白及多糖对酪氨酸酶活性及黑色素生成的影响
目的:观察白及多糖对酪氨酸酶(TYR)活性及黑色素形成相关蛋白TYR、小眼畸形相关转录因子(MITF)表达的影响.方法:超声提取白及多糖粗品.用不同浓度的白及多糖(0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 g/L)和曲酸(阳性对照,0.1、0.2、0.4 g/L)作用于小鼠B16黑色素瘤细胞,用于检测细胞活性、TYR活性;各组细胞分别加入α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)及不同浓度药物共培养后检测黑色素含量;将细胞分为空白组、模型组(α-MSH)、曲酸组及白及多糖低、中、高剂量组,予相应干预48 h后,应用Western blot检测B16细胞TYR和小眼畸形相关转录因子(MITF)的蛋白表达情况.结果:不同浓度曲酸组、白及多糖(0.05～0.8 g/L)组、空白组间的细胞活性差异无统计学意义(P＞0.05).与空白组比较,白及多糖在浓度0.1～0.8 g/L对TYR的活性有显著抑制作用(P＜0.05,P＜0.01),其作用与阳性对照曲酸相当;白及多糖在浓度0.1～0.8 g/L有较高的抑制黑色素生成作用(P＜0.05,P＜0.01);白及多糖浓度0.2～0.4 g/L对TYR、MITF蛋白表达水平有明显抑制作用(P＜0.05).结论:白及多糖可能通过抑制TYR的活性和蛋白表达及MITF的蛋白表达,起到抑制黑色素生成的作用.
关键词： 白及多糖 黑色素 小鼠B16黑色素瘤细胞 酪氨酸酶 小眼畸形相关转录因子 -
马尾松树皮提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞中黑色素生成抑制效果及其机制的初步研究
目的 探讨马尾松树皮提取物( Pinus massoniana bark extract,PMBE)抑制小鼠B16黑色素瘤细胞中黑色素的生成效果及其分子机制.方法 10 ～ 50 μg/ml的PMBE与小鼠B16黑色素瘤细胞共培养后进行各项细胞学研究:MTT法检测PMBE对细胞的毒性；以左旋多巴为底物测定PMBE对酪氨酸酶(TYR)活性的抑制作用；DCM法检测PMBE对细胞ROS的清除能力；比色法测定PMBE对细胞内黑色素生成的抑制效果以及对细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、GSH/GSSG的影响；RT-PCR检测酪氨酸酶及其相关蛋白1(TRP-1)和2(TRP-2)在mRNA水平表达量的影响.结果 PMBE对小鼠B16黑色素瘤细胞的增殖无明显影响,并可显著减少细胞内的黑色素含量.另外,PMBE对活性氧具有很强的清除能力,同时可上调细胞内GSH/GSSG比率,从而增强细胞的还原力.PMBE还对酪氨酸酶活性表现出了一定的抑制效果,但这种抑制却并不发生在mRNA水平.结论 PMBE对小鼠B16黑色素瘤细胞内黑色素生成具有显著抑制效果并主要通过降低酪氨酸酶活性和清除活性氧来实现.
关键词： 马尾松树皮提取物 黑色素 小鼠B16黑色素瘤细胞 酪氨酸酶
