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Annexin B1分子结构、Ca2+结合位点与进化的分析
目的:研究Annexin B1与其他膜联蛋白的相关性及生物学功能.方法:从Swiss-Prot和NCBI-Structure数据库中已知的膜联蛋白氨基酸序列中,根据物种的分类挑选68个,用生物信息学方法分析Annexin B1的结构、功能与进化.结果:Annexin B1包含4个序列和结构高度相似的结构域,含有8个Ca2+结合位点,二级结构显示蛋白主要由α螺旋结构组成,具有寄生生物所特有的氨基酸残基.在物种进化上,Annexin B1和节肢动物为1支,新杆线虫、植物、鸟类和脊椎动物为1支,原虫、腔肠动物、两栖类和脊索动物为1支.另外,Annexin B1与Annexin A1在进化上有较强的亲缘关系,结构和功能上An-nexin A1和Annexin A5相似.结论:Annexin B1具有膜联蛋白的结构特征,含有抗凝血、参与细胞凋亡、炎性反应、信号转导和细胞分化等细胞生理功能的氨基酸结构域和决定种属特异性的氨基酸序列,在进化上同源于Annexin A1.
关键词： Annexin B1 结构 功能 进化 -
Annexin B1:一种新的细胞凋亡检测用蛋白
目的:为细胞凋亡研究提供一种新的检测用蛋白.方法:在大肠杆菌中表达An nexin B1蛋白,经离子交换层析后得纯品,异硫氰酸荧光黄(fluorescein isothiocyanate ,FITC)标记Annexin B1;选用Jarkat细胞,羟基喜树碱诱导该细胞凋亡;以FITC标记的Ann exin B1检测凋亡细胞.结果:FITC标记的Annexin B1与凋亡细胞膜表面磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)结合, 使凋亡细胞呈阳性着色, 能有效检测细胞凋亡 .结论:开发得到了一种新的细胞凋亡检测用蛋白Annexin B1,为推广高效快捷的凋亡检测技术提供国产试剂奠定了基础.
关键词： Annexin B1 细胞凋亡 -
Annexin B1与磷脂酰丝氨酸的结合活性
目的:研究annexin B1与磷脂酰丝氨酸的结合活性.方法:在大肠杆菌中表达annexin B1蛋白,经离子交换层析得纯品;选用U937细胞,以过氧化氢诱导凋亡,制备小鼠洗涤血小板,凝血酶激活;以异硫氰酸荧光黄(FITC)标记的annexin B1检测凋亡细胞和活化血小板.结果:FITC标记的annexin B1既能与凋亡细胞特异性结合,又能与活化血小板特异性结合,结合活性接近annexin Ⅴ.结论:研究表明annexin B1可结合于凋亡细胞和活化血小板膜上的磷脂酰丝氨酸(PS),而非其他膜成分,也进一步阐明annexin B1的抗凝血功能是通过与血小板膜磷脂结合干扰凝血过程.
关键词： Annexin B1 磷脂酰丝氨酸 活化血小板 凋亡细胞
