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实时荧光PCR与BACTEC MGIT960快速培养在初治痰涂片阴性未受抗结核治疗的肺结核诊断中的应用
目的:探讨实时荧光PCR与BACTEC MGIT 960分枝杆菌快速培养(快速培养法)准确诊断初治痰涂片阴性(涂阴)且未经受抗结核治疗的肺结核可能性.方法:实验组:368份临床诊断活动性肺结核患者的初治涂片阴性痰标本;对照组:55份非结核性肺部疾病患者的痰液标本.用FQ-PCR技术、快速培养法及改良罗氏培养参考法对两组标本进行分析,观察指标为TB-DNA和结核菌阳性率.结果:实验组和对照标本中FQ-PCR技术、快速培养法和改良罗氏培养参考法检测的TB-DNA或结核菌阳性率分别为:16.85%、23.37%、22.01%和1%、0%、0%.三种方法分别平均耗时3h、9.6d和28d.以改良罗氏培养参考法为参照,FQ-PCR法和快速培养法的敏感性分别为69.1%和100%;特异性分别为91.2%和98.6%.结论:FQ-PCR和快速培养法均能提高初治涂阴肺结核患者的早期确诊率,但FQ-PCR的敏感性尚需进一步提高.
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荧光定量PCR检测技术在肺结核诊断中的应用
目的:探讨荧光定量 PCR检测结核分枝杆菌(结核杆菌)DNA在肺结核诊断中的应用价值。方法研究对象为门诊和住院的肺结核患者164例,均做痰涂片找抗酸杆菌、痰结核杆菌DNA检测、痰结核菌培养,按痰涂片找抗酸杆菌结果分为涂阳肺结核组(A组)45例,涂阴肺结核组(B组)119例;对痰结核杆菌DNA检测阳性者,立即再行耐药基因检测;对痰涂片找抗酸杆菌阳性而结核杆菌DNA检测阴性者行非结核分枝杆菌菌种鉴定。结果 A 组痰结核杆菌DNA 阳性率95.6%(43/45),结核菌培养阳性率84.4%(38/45),B组痰结核杆菌DNA阳性率38.6%(46/119),结核菌培养阳性率11.8%(14/119);A组中痰结核杆菌D N A阴性2例,其中1例为胞内分枝杆菌,1例为鸟分枝杆菌;结核杆菌DNA阳性89例中发现耐药22例,其中单耐药12例,多耐药8例,耐多药2例;原始单耐药3例;原始多耐药1例;原始耐多药1例。结论荧光定量PCR检测结核杆菌DNA对诊断结核病有较高的敏感性与特异性,可以缩短诊断时间,提高诊断率,并可及时发现耐药结核菌感染和非结核分枝杆菌感染,为及时调整治疗方案提供依据。
关键词: 结核杆菌脱氧核糖核酸 痰涂片抗酸染色法 荧光定量聚合酶链反应