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Hlrg蛋白文献资料
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RNA干扰对过表达Hlrg的Hep G2细胞的影响
为观察RNA干扰对过表达Hlrg蛋白的Hep G2细胞的影响,构建了封闭Hlrg基因表达的shRNA表达载体pAVU6+27-Hlrg,将pAVU6+27-Hlrg稳定转染到过表达Hlrg蛋白的Hep G2细胞中;分别用相差倒置显微镜、FCM、SABC-FITC、RT-PCR、Western blot等观察细胞改变.测序结果表明pAVU6+27-Hlrg构建成功;针对Hlrg的RNA干扰已完成;相差倒置显微镜发现细胞突起增加;FCM显示干扰组G1期明显缩短.针对Hlrg的RNA干扰能促进过表达Hlrg蛋白的Hep G2细胞的生长.
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稳定过表达的HLrg蛋白对HepG2细胞周期和细胞形态的影响
目的 在肝癌细胞系HepG2中稳定过表达HLrg,观察过表达的HLrg蛋白对HepG2的细胞周期和细胞形态等生物学影响.方法 构建真核重组表达质粒pcDNA3.1(+)-hlrg,转染到HepG2细胞并进行稳定筛选;对稳定过表达pcDNA3.1(+)空载体的对照组、pcDNA3.1(+)-hlrg的实验组进行观察.Western blot进行HLrg蛋白的鉴定.流式细胞仪测定细胞周期、MTT法测定生长曲线、透射电子显微镜观测细胞形态的改变.结果 获得了稳定过表达pcDNA3.1(+)-hlrg的HepG2细胞株.与对照组相比,过表达HLrg蛋白的细胞株出现G1阻滞,微绒毛减少,分裂相减少,生长趋缓.结论 稳定过表达的HLrg蛋白对细胞周期有调节作用,对肝癌细胞HepG2具有生长阻滞的作用.
