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高效液相色谱-库仑电化学法在维生素E检测中的应用
目的 建立高效液相色谱-库伦电化学检测法测定儿童、孕妇血浆或血清维生素E(α)的方法 .方法 取一定量血清或血浆用无水乙醇沉淀蛋白,用正己烷萃取维生素E,将己烷层移走,用氮气吹干蒸发成干燥状态,残留物用乙醇重新溶解,溶解后的化合物用C18柱子通过反相液相色谱法来分离,用库仑陈列电化学检测器,进样10μl分析;色谱条件:色谱柱为ESA MD-150 C18Column(150mm×3.0mm,3μm),流动相为甲醇、水、正丙醇按比例配成,流速为0.8ml/min,柱温30℃.结果 维生素E标准曲线线性良好,相关系数r=0.9952,维生素E回收率在90%以上.结论 该法快速、灵敏、准确,样品处理简便易行,可用于儿童、孕妇血清维生素的测定及群体普查.
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二极管阵列反相高效液相色谱法测定人血清中维生素E含量
目的:建立二极管阵列反相高效液相色谱法(PDA-HPLC)测定人血清中维生素E(α)含量的方法.方法:吸取血清,加入甲醇乙腈混合溶液及正己烷,旋涡混合、离心,分离正己烷层,氮气吹干,残渣用甲醇溶解后进样.采用XDB-C8 色谱柱(5 μm,4.6×150mm),流动相为甲醇,流速1.0 ml/min,二极管阵列检测器检测.结果:α-VE浓度在2.1~21.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9999,n=5),样品加标平均回收率为98.3%,相对标准偏差(RSD)<5%,低检测量5 ng.结论:二极管阵列反相高效液相色谱法(PDA-HPLC)测定人血清中维生素E(α)含量的方法,定性准确,灵敏度高,回收率和重现性良好,操作快速、简便,结果准确可靠.