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成年期甲状腺功能减退症大鼠额叶突触结合蛋白I表达及T4替代治疗作用
目的 观察成年期甲状腺功能减退症(甲减)大鼠额叶突触结合蛋白I(synaptotagmin I,sytI)表达改变及不同剂量甲状腺素替代治疗的作用.方法 将44只大鼠按体质量随机分为甲减组、常规治疗组、大剂量治疗组、对照组,用丙基硫氧嘧啶(PTU)腹腔注射建立成年期大鼠甲减及治疗模型;放射免疫法测定4组大鼠血清甲状腺激素水平,免疫组织化学S-P法分析sytI蛋白在4组大鼠额叶分子层、外颗粒层、外锥体细胞层、内颗粒层、内锥体细胞层中的表达.结果 甲减组大鼠血清T3、T4[(0.34±0.04)、(43.01±2.95)nmol/L]显著低于对照组[(0.65±0.15)、(55.20±3.56)nmol/L,F值分别为6.026、4.503,P<0.05或<0.01],甲减组鼠syt I免疫反应产物在额叶分子层(0.018±0.010)、外颗粒层(0.020±0.007)、外锥体细胞层(0.013±0.008)、内颗粒层(0.011±0.005)、内锥体细胞层(0.024±0.013)均较对照组(0.028±0.010、0.031±0.010、0.028±0.010、0.022±0.008、0.038±0.013)明显减少(F值分别为5.697、8.965、14.668、13.597、6.807,P<0.05或<0.01).常规治疗组大鼠血清T3、T4[(0.63±0.05)、(55.04±3.77)nmoL/L]与对照组比较,差异无统计学意义(F值分别为3.162、0.367,P均>0.05),额叶分子层、外颗粒层、外锥体细胞层、内颗粒层、内锥体细胞层syt I蛋白表达(0.027±0.013、0.025±0.009、0.022±0.008、0.020±0.010、0.033±0.010)与对照组比较差异均无统计学意义(F值分别为0.094、2.208、2.467、0.350、0.693,P均>0.05);大剂量治疗组大鼠血清T3、T4[(1.11±0.10)、(96.68±6.42)nmol/L]显著高于对照组(F值分别为6.291、12.031,P均<0.01),额叶各层syt I蛋白表达(0.028±0.008、0.031±0.011、0.026±0.012、0.023±0.011、0.038±0.010)与对照组比较的差异均无统计学意义(F值分别为0.001、0.019、0.111、0.061、0.001,P均>0.05).结论 成年期甲减大鼠额叶内syt I蛋白表达减少,常规剂量甲状腺素替代治疗就能使其恢复至正常水平.
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99Tcm-Syt I-C2A突变体蛋白在心肌缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡显像中的应用
目的 探讨99Tcm标记突触结合蛋白I-C2A片段突变体(99Tcm-Syt I-C2A-G4C)在心肌凋亡显像中的应用.方法 (1)采用亚锡还原法制备99Tcm-Syt I-C2A-G4C.99 Tcm-Syt I-C2A-G4C经纯化后通过纸层析法测定放化纯；细胞结合实验测定99Tcm-Syt I-C2A-G4C与磷脂酰丝氨酸的结合能力.(2)选用5头小猪制备心肌缺血-再灌注损伤模型,静脉注射99mTc-Cyt-C2A-G4C 2 h后进行图像采集,计算心肌异常高放射性区/本底(T/B)比值；同时使用原位末端标记法(TUNEL)分析损伤心肌中细胞凋亡情况.结果 (1)标记后的99Tcm-Syt I-C2A-G4C放射化学纯度为(96.42±0.76)％；(2)99Tcm-Syt I-C2A-G4C与喜树碱处理组细胞结合测定的放射性计数是未处理组细胞的5.23±0.38倍；(3)99mTc-Cyt-C2A-G4C注射后2h,心肌部位可见明显的局部放射性异常浓聚,T/B比值为3.40±0.43；高放射性心肌组织标本,TUNEL染色亦可见大量黄染的凋亡细胞.结论 99Tcm-Syt I-C2A-G4C可用于心肌细胞凋亡显像.
