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衰老程度评价生物学指标在人胚肺二倍体细胞的筛选研究
目的:通过在微观结构水平和分子水平检测不同代次人胚肺二倍体细胞衰老相关的指标值,筛选出能够系统性评价人胚肺二倍体细胞衰老程度的生物学指标.方法:将Walvax-2细胞分成16个代次,在倒置显微镜下观察不同代次Walvax-2细胞生长情况及形态学变化;在透射电镜下观察不同代次Walvax-2细胞生长情况和衰老情况;通过检测SA-β-gal染色阳性率,分析不同代次Walvax-2细胞β-半乳糖苷酶的表达水平.结果:细胞可传58代.倒置显微镜下:随细胞代次的增加,可见颜色逐渐加深,色素积累;透射电子显微镜观察到:P20到P43细胞正常且骨架结构明显,细胞核完整,具有较高的核质比,P44和P45开始出现衰老现象,细胞质色素积聚加深,核膜不同程度内折,P50和P55细胞衰老更加明显;β-半乳糖苷酶的阳性染色率和细胞代龄之间呈显著相关(P<0.01).结论:细胞形态学变化,β-半乳糖苷酶阳性率变化与Walvax-2细胞代龄增长显著相关,可选择作为Walvax-2细胞衰老程度评价的生物学指标.
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人胚肺二倍体细胞衰老程度评价生物学指标研究
目的:通过细胞生长曲线、流式细胞术检测人胚肺二倍体细胞不同代次情况,筛选评价人胚肺二倍体细胞衰老程度的生物学指标。方法将 Walvax-2细胞分为16个代次,绘制生长曲线,观察不同代次 Walvax-2细胞的生长增殖情况及细胞活力;通过核酸荧光染料碘化丙啶(PI)作为细胞活力分析的荧光探针使用流式细胞仪检测不同代次 Walvax-2细胞周期时相和细胞凋亡情况。结果P20和 P30的细胞活力明显强于 P40和 P50(均 P <0.05),P40的细胞活力明显强于 P50(P <0.05);G0/G1期所占百分比与细胞代龄间的增长无相关性(P >0.05),而S 期、G2/M期和细胞碎片所占百分比与细胞代龄间的增长显著相关(均 P <0.05)。结论通过绘制生长曲线可区分相隔较大代次的 Walvax-2细胞的生长活力,在进行细胞衰老综合评定时,可通过 PI 作为荧光探针使用流式细胞仪检测细胞周期变化作为 Walvax-2细胞的衰老程度综合评定的指标。