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  • 人白细胞介素-17在干燥综合征患者外周血中的表达及意义

    作者:徐丹

    目的 目的分析不同分期干燥综合征(Sj?gren's syndrome,SS)患者外周血中人白细胞介(interleukin,IL)-17的表达并探讨其临床意义.方法 选择同期SS患者46例及健康体检者23例,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析不同临床病程患者与健康体检者外周血中IL-17的水平;同HE染色法检测唇腺中淋巴细胞浸润程度,分析不同病理级别患者外周血中IL-17差异.结果 与健康组比较,初发组、复发组、稳定组的IL-17水平升高,差异均均具有统计学意义(t=4.125、t=4.317,t=2.916,均P<0.05);稳定组分别与初发组和复发组比较,IL-17水平减低,差异均具有统计学意义(t=2.732、t=3.011,均P<0.05);初发组与复发组比较,差异无统计学意义(t=1.015,P>0.05).Ⅱ级病例的IL-17水平分别与Ⅲ级和Ⅳ级病例比较,差异均具有统计学意义(t=3.028、t=3.104,P<0.05);而Ⅲ级病例与Ⅳ级病例比较,差异无统计学意义(t=0.973,P>0.05).外周血IL-17水平与分级呈正相关性(r=0.887,P<0.05).结论 IL-17在SS的发生发展中起着重要作用,对S S患者病情的动态评估具有积极临床意义.

  • 重组人白细胞介素-17的复性研究

    作者:张傅山;刘钟滨;李荣秀

    目的 探讨重组人白细胞介素-17(rhIL-17)的复性条件.方法 表达重组人白细胞介素-17的大肠杆菌经破碎、包涵体洗涤、裂解提取、复性、Sephacryl S-100层析柱纯化等技术方法,对复性相关参数进行优化.结果 经纯化得到rhIL-17,蛋白纯度为97.2%,探索到了rhIL-17蛋白复性的适条件.结论 通过复性与纯化获得了高纯度有活性的rhIL-17.

  • 一株中和人IL-17免疫活性的单克隆抗体的制备

    作者:孙阳;谷学佳;叶贤龙;徐黎明;陈睿;任桂萍;王秋颖;丁良军;李德山

    目的 制备抗人IL-17单克隆抗体,并鉴定其中和活性.方法 用hIL-17作为免疫和检测抗原,用间接ELISA法筛选分泌抗人IL-17抗体的杂交瘤细胞株,并对抗体进行中和活性鉴定.结果 获得1株稳定分泌抗人IL-17单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗类型重链为IgG2b,轻链为κ;该株杂交瘤细胞腹水效价为1:8.192×105;传30代及液氮中保存6个月,抗体效价稳定;Western Blot检测证明该单抗与人IL-17蛋白特异地结合;单抗亲和常数为8.192×10-9mol/L;ELISA及Realtime-PCR检测证明该单抗能够有效地阻断人IL-17刺激Hela细胞产生IL-6的作用.结论 所制备的抗人IL-17单克隆抗体具有高度的特异性、稳定性及中和活性,为针对IL-17为靶点的抗体药物的开发奠定了基础.

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