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GLP-1-Fc融合蛋白文献资料
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不同信号肽对GLP-1-Fc融合蛋白表达的影响
目的 探讨不同信号肽对GLP-1-Fc融合蛋白表达的影响.方法 对含7种不同信号肽(A～G)GLP-1-Fc融合蛋白的谷氨酰胺缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHOK1SV GS-KO)进行流加培养,评估含各信号肽细胞的比生长率,并检测融合蛋白的表达量、反相纯度、电荷异质性组成、降解比例及糖型.同时对含优信号肽GLP-1-Fc融合蛋白的细胞进行高密度发酵,并检测生物活性.结果 含信号肽E的重组细胞比生长率略低,相应的融合蛋白表达量也略低,但反相纯度较高,酸性异构体比例较低,主峰含量高,且降解比例较低,糖型GOF/GOF含量高,整体质量较好,因此确定其为佳信号肽.含信号肽E的细胞在1L和7L细胞反应器中发酵,RP-HPLC纯度分别高达89.66％和89.76％,生物活性与市售参比制剂一致.结论 信号肽的筛选和优化需综合评估信号肽对融合蛋白表达量和产物关键质量属性的影响.
关键词： 信号肽 GLP-1-Fc融合蛋白 CHO细胞
