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人恶性黑色素瘤A375细胞黑素刺激素受体(MC1R)的检测
目的检测人恶性黑色素瘤A375细胞膜上MC1R蛋白及其cDNA,为研究黑色素瘤细胞表面受体及靶向配体奠定基础.方法利用放射配体分析法检测人恶性黑色素瘤A375细胞膜上的MC1R蛋白;用RT-PCR方法扩增人恶性黑色素瘤A375细胞MC1R的cDNA,并克隆至pMD-18T质粒,进行酶切分析鉴定及扩增片段DNA序列测定.结果放射配体分析结果表明,125I-αMSH可与人恶性黑色素瘤A375细胞膜特异结合.RT-PCR结果显示,扩增产物的大小与MC1R的cDNA相符.测序结果证实扩增片段为MC1R基因的特异片段.结论证实人恶性黑色素瘤A375细胞膜上表达MC1R蛋白.MC1R基因的成功克隆为其进一步研究提供了必要条件.
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原发性肝癌组织中生长激素受体的表达及其意义
背景与目的:重组人生长激素( recombine human growth hormone,rhGH)在调节代谢、降低外科病人死亡率方面,疗效明显,然而 rhGH能否用于治疗原发性肝癌患者,目前存在较大争议.由于生长激素必须通过与其受体( growth hormone receptor,GHR)结合方能发挥作用,因此本研究旨在通过了解原发性肝癌( hepatocellular carcinoma,HCC)组织生长激素受体的表达情况,探讨 rhGH在肝癌患者中是否适用.方法:应用放射性配体法对 40例 HCC组织进行 GHR的检测,以 6例正常肝组织作为对照,肝组织 GHR的受体大结合量( RT)和平衡解离常数 (Kd)采用 Scatchard法计算;并分析肝癌 GHR的 RT值与肝癌临床病理特点之间的关系.结果:在正常肝组织与 35例 HCC组织中检测到单一的生长激素 (GH)特异性结 合位点(即 GHR),对照组肝组织 GHR的 RT值为 (39.5467± 3.4770) fmol/mg protein, Kd为 (0.6167± 0.1007)nmol/L,肝癌组织 GHR的 RT为 (18.5416± 4.1686)fmol/mg protein,肝癌组织 GHR的 Kd值为 (0.6319± 0.1978)nmol/L ,与正常肝组织相比,肝癌 GHR的 RT显著性降低 (P< 0.05) ,而 Kd无显著性改变 (P >0.05);肝癌组织 GHR的 RT值与肿瘤大小、患者临床分期呈显著性负相关,而与肿瘤分化程度、患者年龄、是否合并肝硬变无显著性相关.在 5例肝癌组织未检测到 GHR.结论:本组结果显示,大多数原发性肝癌组织仍表达低水平的 GHR,在其受体功能未明的情况下,用 rhGH治疗肝癌患者应慎重.
