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shR-377联合细胞因子诱导人脂肪间充质干细胞向神经干细胞定向分化
目的：探索shR-377联合细胞因子诱导人脂肪间充质干细胞（ HADMSCs）向神经干细胞（ NSCs）定向分化。方法采用吸脂术获取健康青年人腹部大网膜脂肪组织，胶原酶消化法分离HADMSCs，行表型鉴定和细胞周期检测。 shR-377转染第三代HADMSCs，48 h后流式检测 nes-tin表达率，72 h后行RT-qPCR和免疫细胞化学测定 nestin 和 musashi，并对转化后细胞增殖培养分析。结果流式结果显示 HADMSCs 表面标志CD45及CD117表达呈阴性，CD29及CD44呈阳性，诱导24 h后nestin表达率为（64.6±3.2％）；RT-qPCR结果表明诱导72 h后神经干样细胞球 nes-tin、musashi表达阳性，免疫细胞化学染色可见nestin染色阳性。神经干样细胞球增殖培养7 d可见多个克隆球。神经干样细胞球进一步分化培养，可见到很明显的细长突触，双极或多极神经元样形态。结论 shR-377联合细胞因子的诱导方法可以使 HADMSCs 定向分化为 NSCs，诱导时间约48 h。转化时间和转化率比传统方法有较大提高，为体外大量获得NSCs提供了实验依据。
