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腺苷预处理星形胶质细胞氧糖剥夺复氧糖后CX3 CL1、GLT-1表达的变化
目的：探讨在缺氧复氧情况下腺苷预处理诱导星形胶质细胞谷氨酸转运体蛋白（GLT-1）和趋化因子（CX3CL1）的表达变化。方法原代培养的大鼠星形胶质细胞分为正常组、模型组和腺苷预处理组。模型组：细胞接受5 h氧糖剥夺／复氧糖24 h处理；腺苷预处理组：细胞在氧糖剥夺前24 h加入100μmol／L腺苷后接受5 h氧糖剥夺／复氧糖24 h。在5 h氧糖剥夺／复氧糖24 h后观察各组的细胞形态、MTT法检测各组细胞活力，ELISA检测各组CX3CL1的相对表达情况，免疫荧光法及Western印迹法检测各组GLT-1的相对表达情况。结果①正常组、模型组和腺苷预处理组在氧糖剥夺5 h复氧糖24 h后细胞活力（OD值）分别是（0.763±0.065），（0.217±0.052）和（0.404±0.013），腺苷可以减少缺氧复氧引起的损伤（P＜0.05）。②与正常组相比，星形胶质细胞在缺氧复氧后，其释放的趋化因子 CX3CL1明显升高（P＜0.05），GLT-1的表达明显降低（P＜0.05）。与模型组相比，腺苷预处理组可明显降低缺氧复氧组CX3CL1的释放（P＜0.05），以及增加缺氧复氧GLT-1的表达水平（P＜0.05）。结论腺苷预处理可使氧糖剥夺／复氧糖后CX3CL1的释放减少，GLT-1表达量升高，从而增强脑对缺血再灌注损伤的耐受。
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腺苷预处理对氧糖剥夺/复氧糖诱导的星形胶质细胞及脂质运载蛋白-2表达的影响
目的:探讨在氧糖剥夺/复氧糖(OGD/R)情况下腺苷预处理对体外培养星形胶质细胞的影响和脂质运载蛋白-2(LCN-2)表达的影响及其意义.方法:原代培养的大鼠星形胶质细胞随机分为腺苷预处理对照组(Ado-treated control)、对照组(Control)、实验组(ADO/R)和模型组(OGD/R).用MTF法检测各组细胞活力,ELISA检测各组OGD/R后细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH)的浓度,免疫荧光及免疫印迹检测各组LCN-2的相对表达.结果:腺苷预处理对照组与对照组的细胞活力、LDH浓度和LCN-2的表达量均无明显差别.与腺苷预处理对照组、对照组相比,模型组细胞损伤程度和LCN-2的表达量均明显升高.与模型组相比,实验组细胞损伤程度和LCN-2的表达量均明显降低.结论:腺苷可以通过减少LCN-2的释放明显改善OGD/R所引起的星形胶质细胞的损伤,从而增强脑组织对缺血再灌注损伤的耐受.
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丁基苯酞对氧糖剥夺/复氧糖诱导的星形胶质细胞中caspase-3表达的影响
目的 探讨丁基苯酞对氧糖剥夺/复氧糖诱导的星形胶质细胞中caspase-3表达的影响.方法 将原代培养、鉴定的Sprague-Dawley大鼠星形胶质细胞随机分为对照组、模型组和实验组,各组细胞经高糖达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)培养48 h,细胞贴壁并伸出突触后实验组及模型组更换DMEM无糖培养基进行氧糖剥夺,对照组仍使用DMEM高糖培养基培养,3组细胞放入培养箱中孵育6h后,实验组更换为含100 μmol·L-1丁基苯酞的DMEM高糖培养基,模型组更换为DMEM高糖培养基进行氧糖剥夺/复氧糖,对照组更换新的DMEM高糖培养基,继续培养24h.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞活力,免疫荧光及免疫印迹法检测星形胶质细胞中caspase-3表达,酶联免疫吸附试验检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)表达.结果 MTT法结果显示,对照组星形胶质细胞活力高于实验组和模型组(P＜0.05),实验组星形胶质细胞活力显著高于模型组(P＜0.05).免疫荧光染色结果显示,对照组星形胶质细胞内荧光信号弱;模型组星形胶质细胞内荧光信号强;实验组星形胶质细胞内荧光信号强度较模型组降低,但高于对照组(P＜0.05).免疫印迹检测结果显示,模型组星形胶质细胞在氧糖剥夺/复氧糖后caspase-3表达相对高,实验组次之,对照组低,各组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).氧糖剥夺/复氧糖24h后,实验组细胞培养液中LDH水平高于对照组(P＜0.05),模型组细胞培养液中LDH水平显著高于实验组(P＜0.05).结论 丁基苯酞可以改善氧糖剥夺/复氧糖引起的星形胶质细胞损伤.
