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嵌合免疫受体活性的体外检测
目的:体外检测嵌合免疫受体3(CIR3)的活性,为肿瘤的过继免疫治疗提供可靠依据.方法:将已经构建好的CIR3通过电穿孔法转染人T淋巴细胞,检测其在T淋巴细胞的表达及与CEA阳性胃癌细胞株MKN-45的结合情况和IL-2产生情况.结果:CIR3成功转染并表达在T细胞的表面,转染CIR3的T细胞体外能够识别胃癌细胞株MKN-45并与之结合形成典型的花环结构,受CEA刺激后能产生细胞因子IL-2.结论:表达在T淋巴细胞表面的CIR3能够有效结合肿瘤细胞并不受MHC的限制,受CEA刺激后能产生细胞因子IL-2,为下一步的体内实验提供可靠依据.
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四种嵌合免疫受体在T淋巴细胞中的表达分析
目的 利用基因工程技术构建含人源抗癌胚抗原(CEA)单链抗体(scFv)的4种嵌合免疫受体(CIR),比较其在T淋巴细胞表面表达的情况.方法 将构建好的嵌合免疫受体CIRZ、CIR1、CIR2、CIR3通过电穿孔方法分别转染人T淋巴细胞,流式细胞仪检测各嵌合免疫受体在T淋巴细胞的表达情况.结果 有3种嵌合免疫受体成功表达在T细胞的表面,它们分别是CIR1、CIR2、CIR3,其中CIR3的表达更好.结论 嵌合免疫受体能够在T淋巴细胞的表面有效表达,为下一步的体内实验打下基础,同时为这一治疗策略终应用于临床提供可靠的实验依据.
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嵌合免疫受体在T淋巴细胞中的表达及意义分析
目的 了解在T淋巴细胞中嵌合免疫受体的过继性,为今后治疗提供理论依据.方法 通过电穿孔方式,将四种嵌合免疫受体转染人T淋巴细胞,此时嵌合免疫受体中已经将含有人源的单链抗体以及抗癌胚抗原.采用流式细胞仪了解其在T淋巴细胞中的形象以及状态.结果 研究的4种嵌合免疫受体中有3种表达成功,其中CIR3在T淋巴细胞中表达状态好,CIRZ未表达.结论 在T淋巴细胞中,嵌合免疫受体能够有效表达,为今后实验方向打下了基础,并为其临床应用提供数据依据.
