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一株草鱼呼肠孤病毒检测用单克隆抗体的制备及其特性
草鱼出血病是由草鱼呼肠孤病毒( Grass Crap Reovirus,GCRV)引起的病毒性疾病,传染性强,对草鱼的致死率极高,是危害我国水产养殖业严重的疾病之一[1].因此,采用快速有效的手段检测草鱼呼肠孤病毒对诊断草鱼出血病具有重要的意义.
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草鱼出血病灭活疫苗上调草鱼脾细胞主要免疫分子的表达
目的 探讨草鱼出血病灭活疫苗对草鱼脾脏中IgM、主要组织相容性复合体Ⅰ (MHC Ⅰ)、1型干扰素(IFN1)、补体3(C3)、白细胞介素1β(IL-1β)、内凝集素(intelectin)相关基因表达的影响.方法 用草鱼肾细胞系(CIK)培养草鱼呼肠孤病毒(GCRV),并制备草鱼出血病灭活疫苗,用生理盐水稀释成50倍和100倍,包括未稀释组及生理盐水对照共4组.分别腹腔免疫注射健康草鱼,各组分别于免疫后0、6、12、24、72 h,取脾脏并抽提总RNA,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测上述6种免疫相关基因mRNA表达.结果 与生理盐水对照组相比,免疫注射不同剂量的草鱼出血病灭活疫苗均能刺激草鱼脾脏中6种主要免疫分子不同程度的表达上调,表明疫苗刺激草鱼机体启动了非特异性和特异性免疫应答.在3个疫苗免疫组中,intelectin、MHC Ⅰ、IL-1β、C3基因的相对表达量都随着时间的推移出现先表达上调,后表达下调;基因IFN1的相对表达量在免疫后6h达到峰值,之后下降至正常水平;IgM的相对表达量在所检测时间内呈逐渐上调的趋势.结论 草鱼出血病灭活疫苗均能诱导草鱼脾脏中免疫相关分子基因的表达上调.
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2014-2016年全国草鱼出血病病原检测能力情况分析
为了进一步加强水生动物防疫系统实验室能力建设,提升水生动物疫病检测水平,推动实验室能力认证认可,建立和完善实验室考核管理机制,2014-2016年农业部全国水产技术推广总站委托中国检验检疫科学研究院组织开展了草鱼出血病病原检测能力验证项目.3年参试实验室共计69家次,满意结果从53％上升到88％.结果表明,通过3年测试,全国草鱼出血病病原检测能力提升较快,为该病的诊断与防控提供了技术支撑.
