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感觉神经肽P物质对气道平滑肌细胞收缩幅度的影响
目的 探讨感觉神经肽P物质对气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell,ASMC)收缩幅度的影响.方法 将10只Wistar大鼠按照随机分组原则分成正常对照组及哮喘模型组,卵蛋白吸入法制作哮喘大鼠模型;原代培养两组大鼠气道平滑肌细胞;激光共聚焦显微镜观察ASMC在不同干预因素干预前后细胞形态及收缩的长度的变化,计算各组细胞收缩百分比,对各组ASMC收缩长度百分比进行统计学分析.结果 乙酰胆碱干预组及P物质干预组ASMC体积明显变小,细胞直径缩短,胞浆减少,细胞排列密集.P物质受体拮抗剂干预组及尼莫地平干预组ASMC细胞体积与正常对照组细胞体积大小相仿,细胞呈梭形,胞浆丰富,细胞排列规则.乙酰胆碱干预组细胞收缩百分比大(19.60 ±3.47)％,尼莫地平干预组细胞收缩百分比小(3.25±1.14)％,P物质受体拮抗剂干预组细胞收缩百分比(3.56±1.03)％较正常对照组(3.54±1.26)％大,但较乙酰胆碱干预组(19.60±3.47)％、哮喘组(14.36±2.37)％及P物质干预组(17.79±3.19)％小,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 感觉神经肽P物质会增加ASMC收缩幅度,但其收缩幅度较乙酰胆碱小;其受体拮抗剂有抑制平滑肌细胞收缩能力的作用,但其抑制能力较尼莫地平弱.感觉神经肽P物质通过增加气道平滑肌细胞收缩力参与哮喘急性发作.
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神经肽-1受体拮抗剂对哮喘大鼠气道平滑肌细胞内钙离子浓度的影响
目的 探讨神经肽-1受体(NK-1R)拮抗剂WIN62577对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)内钙离子浓度的影响及其调节机制,为哮喘气道反应性的治疗寻找新的途径.方法 采用OVA吸入法制作哮喘模型.原代培养大鼠ASMC.细胞内钙离子荧光成像系统检测ASMC内钙离子浓度.Real-time PCR检测各组ASMC中SERCA2mRNA(肌浆网钙ATP酶)及IP3RmRNA(三磷酸肌醇受体)表达,组间采用单因素方差分析比较各组间差异,P<0.05为差异有显著性.结果 哮喘组ASMC中钙离子浓度较正常组增高;正常组ASMC内钙离子浓度在P物质干预后迅速升高;哮喘组ASMC内钙离子浓度在WIN62577干预后迅速下降.正常组及NK-1R拮抗剂干预哮喘ASMC组中SERCA2mR NA表达与哮喘组比较,差异均有显著性(P<0.05);哮喘组ASMC中IP3RmRNA表达与正常组ASMC比较差异无显著性(P>0.05);NK-1R拮抗剂干预哮喘ASMC组IP3RmRNA表达较哮喘组比较差异有显著性(P<0.05).结论 哮喘大鼠ASMC中SERCA2表达减少,WIN62577通过提高SERCA2及降低IP3K表达从而降低细胞内钙离子浓度改善哮喘气道高反应性.
