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人毛囊干细胞分离培养与鉴定方法的研究
目的 实现毛囊干细胞的高效快速分离.方法 将人头部皮肤标本显微分离毛囊隆突区组织由中性蛋白酶消化后,将其直接接种于Matrigel包被的培养板中培养.细胞迁出后,待细胞融合达到60% ~ 70%时,传代培养.取传代培养4周的人毛囊干细胞进行流式细胞学分析及克隆形成能力测定,鉴定毛囊干细胞的表型及增殖潜能.结果 分离培养所得毛囊干细胞呈铺路石样生长,细胞胞体较大,细胞核大而明显,具有较高的核质比,干细胞细胞学特征明显.流式细胞仪鉴定毛囊干细胞表面标记物Lgr5阳性率为84.02%,Lgr6阳性率为66.32%.细胞增殖能力及克隆形成能力测定结果显示,毛囊干细胞具有较强的增殖潜能,可由单细胞生成明显的克隆集落.结论 本研究通过显微解剖结合消化法,实现了人头皮毛囊干细胞的高效快速分离培养.采用显微分离培养获得毛囊隆突区细胞,细胞表型分析证实其Lgr5及Lgr6阳性干细胞比率、细胞形态、细胞周期及克隆形成能力均符合干细胞特性.
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糖蛋白激素受体 Lgr6的结构和功能
Lgr6是富含亮氨酸的 G 蛋白偶联受体,在人体组织中广泛分布,在胎盘、脑、心脏、肝、肺、小肠等均有表达。作为糖蛋白激素受体家族的新成员,目前尚未发现其生理性配体,故又称 Lgr6为孤儿受体。研究发现,Lgr6标记的毛囊干细胞能分化成皮肤所有细胞系,参与皮肤更新及损伤修复,而且 Lgr6在肿瘤组织中的表达也有重要的生物学意义。笔者对 Lgr6的结构和功能进行综述。