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外周血白蛋白mRNA分析在肝癌诊断和转移监测中的价值
目的探讨外周血有核细胞中白蛋白(Alb)基因在肝癌诊断和转移监测中的价值。方法以逆转录巢式PCR法扩增肝癌组织及外周血中Alb基因片段，分析其在肝癌诊断和转移监测中的价值。结果 20份肝癌、癌周和远癌组织总RNA浓度，表现为远癌和癌周组织明显高于癌灶组织(P＜0.05)。Alb基因检出率在所有肝组织均为100％，在肝癌患者外周血中为59.7％。明显高于肝硬化、慢性肝炎和肝外肿瘤组患者(P＜0.01)，但与急性肝炎组相比未见差别(P＞0.05)；Alb基因在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期肝癌中阳性率分别为33％、37％和77％；在肝内有无转移组间差异明显(P＜0.05)，在伴肝外转移肝癌中全数阳性；在AFP＜50μg/L肝癌中阳性率为17％；Alb基因检出率与肝癌大小间无明显差异(P＞0.05)。结论外周血肝细胞Alb基因分析为肝癌诊断、转移和监测术后复发的有用标志物。
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树鼩CD127全长编码序列的克隆及分子特征分析
目的 树鼩可作为多种人类疾病研究的良好模型,但其免疫系统各类细胞表面标志、功能以及在疾病发生、发展过程中的作用和意义尚无系统研究.研究以获得树鼩调节性T细胞(Tr)相关分子CD127为目的,以分析其分子特征.方法 提取树鼩外周血总RNA反转录,经巢式PCR扩增获得目的片段,进而以Discovery Studio等生物软件进行分析.结果 扩增得到全长为1 392 bp的树鼩CD127编码序列,确定了现有数据库中缺失的一处未知片段.树鼩CD127与人、黑猩猩亲缘关系较近,其氨基酸序列具有较高保守性,蛋白质三维结构整体与人相似,但N糖基化位点数目以及电荷分布存在差异.结论 所得序列能够编码具有正常功能的蛋白,全长序列为后续单克隆抗体制备奠定了基础,有助于鉴定树鼩Treg细胞以及相关疾病机理的研究.
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基因芯片用于SARS早期诊断和病毒载量时相监测研究
目的:采用基因芯片技术对严重急性呼吸综合征(SARS)患者进行病毒载量时相监测,为SARS早期诊断提供参考指标.方法:4例确诊非重症SARS患者,在病程的3～30 d中,间隔2～6 d共7次连续采样.检测标本种类为血液和呼吸道分泌物(痰或鼻、咽拭子).血标本26份,呼吸道分泌物标本24份,共计50份.对SARS-CoV复制酶(replicase)1A、刺蛋白(spike glycoprotein)和核衣壳蛋白(nucleocapsid protein)的编码序列区域进行检测和杂交.基因芯片有严格的反应内控体系和防止污染手段.结果:4例SARS患者在病程第4天第1次采样时,2例患儿呼吸道标本阳性,在病程9～18 d第2、3次采样时,4例患者的所有标本检测均为强阳性或中等程度阳性.在病程18～23 d,第4、5次采样时,所有标本均表现为阳性程度减弱或转为阴性.到病程的22～30 d第6、7次采样检测时,4例患者的呼吸道分泌物和血标本已全部无病毒核酸检出.结论:基因芯片技术为SARS早期诊断和病毒载量时相监测提供了有参考意义的实验数据.
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原发性肝癌外周血白蛋白基因片段扩增的临床意义
目的:探讨外周血白蛋白(Alb)基因在肝癌早期诊断和鉴别诊断中的临床价值.方法:以巢式聚合酶链反应(RT-PCR)扩增外周血中Alb的基因片段分析在原发性肝癌(HCC)、慢性肝病和非肝病患者外周血中血白蛋白基因表达.结果:67例肝癌患者外周血中Alb基因的检出率为59.7%,明显高于肝硬化、慢性肝炎和肝外肿瘤组患者(P<0.01),但与急性肝炎组无明显差别(P>0.05);在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期肝癌中,Alb基因片段阳性率分别为33.3%、36.8%和76.9%;肝内有无转移的肝癌组间存在明显差异(P<0.05),尤其在伴有肝外远处转移的肝癌中,Alb基因全数阳性(100.0%).结论:分析外周血中Alb基因有助于肝癌的诊断、肝癌远处转移判别的监测.
