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乳杆菌细胞壁成分对小鼠阴道组织β-防御素2诱导表达的影响
目的 探讨乳杆菌细胞壁成分(Lactobacillus cell wall extract,LCWE)对小鼠阴道组织β-防御素2诱导表达的影响.方法 将雌性ICR小鼠随机分成5组,实验组给予不同浓度的(5、20和100 mg/L)LCWE 200μL阴道接种处理;阴性对照组小鼠阴道接种生理盐水,阳性对照组小鼠阴道接种大肠埃希菌EPEC104菌液(3×109CFU/mL),5 d后处死,取小鼠阴道组织,做阴道菌群分析评价,部分阴道组织提取总RNA,以β-actin为内参照,采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测小鼠阴道组织β-防御素2表达.结果 20 mg/L和100 mg/L浓度LCWE处理后,小鼠阴道菌群较生理盐水组的肠杆菌、葡萄球菌明显减少(P<0.05),乳杆菌无显著性变化(P>0.05).生理盐水组小鼠阴道组织β-防御素2 mRNA表达量极低,大肠埃希菌阳性对照组能显著诱导小鼠阴道组织β-防御素2 mRNA的表达;5 mg/L浓度LCWE处理组开始,β-防御素2表达量开始提高,在100 mg/L浓度LCWE组其表达量达到高.Western blot结果显示:生理盐水组小鼠阴道组织未检测到β-防御素2蛋白表达,而100 mg/L浓度LCWE处理组和大肠埃希菌EPEC104组均出现特异性条带.结论 LCWE可上调小鼠阴道组织β-防御素2的表达且存在着剂量依赖关系.
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细菌性阴道病hBD-2 mRNA表达的变化及微生态制剂、中药对其影响
目的 研究细菌性阴道病(BV)患者Hbd-2 Mrna表达量的变化和微生态制剂、中药提取物对其的影响.方法 将BV患者随机分为4组,即健康对照组(n=10)、BV组(n=10)、微生态制剂治疗组(n=8)和中药治疗组(n=7).采用RT-PCR半定量法,检测阴道组织Hbd-2 Mrna的水平.结果 与健康对照组相比,BV组、微生态制剂治疗组和中药提取物治疗组Hbd-2 Mrna的水平明显升高(P＜0.05);微生态制剂治疗组和中药治疗组Hbd-2 Mrna的水平平均分别较BV组增高(P＜0.05).结论 微生态制剂和中药对BV患者治疗可以使Hbd-2 Mrna表达水平上调,提示其在维系正常妇女生殖道内环境稳定、宿主天然抗感染机制中起着重要的作用.
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阴道乳杆菌诱导细菌性阴道病患者β-防御素2表达及其抗菌活性的研究
目的 观察阴道乳杆菌诱导阴道黏膜细胞表达β防御素-2 (hBD-2) 的情况,检测其表达,观察hBD-2的体外抗菌活性.方法 分为3组,即健康对照组(n=10)、BV组(n=10)和阴道乳杆菌干预组(n=8).采用RT-PCR半定量法,检测阴道组织hBD-2 mRNA的水平.用琼脂糖弥散法检测其抗菌活性.结果 与健康对照组相比,BV组、阴道乳杆菌干预组hBD-2 mRNA的水平明显升高(P<0.05);阴道乳杆菌干预组hBD-2 mRNA的水平较BV组增高(P<0.05);琼脂糖弥散法显示,hBD-2对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌有明显的杀灭效应.结论 阴道乳杆菌干预对BV患者治疗可以使hBD-2 mRNA表达水平上调,提示其在维系正常妇女生殖道内环境稳定、宿主天然抗感染机制中起着重要的作用.
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盆腔器官脱垂患者阴道组织比较蛋白质组学研究
目的:建立盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapse,POP)患者及非脱垂对照者阴道组织蛋白质双向凝胶电泳图谱,并结合质谱技术分析其差异表达蛋白质,寻找POP疾病相关蛋白,以进一步阐明POP的发病机制.方法:收集绝经后年龄相匹配的POP组和对照组尿道周围阴道壁组织标本各10份,提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳(two-dimensional gel electro-phoresis,2-DE)得到凝胶图谱,采用Image Master 5.0 2D图象分析软件进行匹配和差异分析,识别两组间差异表达蛋白.将部分差异蛋白点胶内原位酶解后进行MALDI-TOF-MS分析,获取肽质量指纹图谱并进行生物信息学检索鉴定蛋白质.结果:得到了分辨率高,重复性好的POP组和对照组阴道壁组织蛋白双向凝胶电泳图谱,POP组的平均蛋白质点数为(871±96)个,正常对照组为(856±89)个.通过比较分析,差异表达蛋白质点数为27个.选取其中8个具有明显差异的蛋白点进行质谱鉴定,初步鉴定出5种蛋白质,其中2个蛋白质在POP组表达上调,3个蛋白质表达下调.结论:两者间存在一些差异表达的蛋白质,为阐明POP发病机制打下了坚实的基础.
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骨形态发生蛋白-1在盆底器官脱垂患者阴道组织中的表达及意义
目的:探讨骨形态发生蛋白-1(BMP-1)在盆底器官脱垂患者阴道组织的表达情况及其在盆底器官脱垂发生中的作用.方法:选择南京军区福州总医院收治的绝经前盆底器官脱垂患者15例为研究组,同期选取因妇科良性疾病行全子宫切除8例患者为对照组.于术中取患者阴道前壁组织,采用RT-PCR检测BMP-1 mRNA的表达,采用免疫印迹方法检测BMP-1两个主要表型(BMP-1-1、BMP-1-3)蛋白表达.结果:盆底器官脱垂患者阴道前壁组织中BMP-1 mRNA以及BMP-1-3蛋白的表达与对照组比较明显减低,差异有高度统计学意义及统计学意义(P＜0.01,P＜0.05)；而BMP-1-1蛋白的表达在两组之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:盆底器官脱垂患者BMP-1表达降低,从而使成熟胶原释放减少,胶原蛋白含量降低,这可能是盆底器官脱垂的发生机制之一.
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"精血归"对初老雌兔阴道组织超氧化物歧化酶的影响
为探讨中医填补精血法改善阴道衰老状况的作用机制,观察了纯中药复方制剂"精血归"对初老雌兔阴道组织超氧化物歧化酶(SOD)的影响.结果表明:①"精血归"能显著提高初老雌兔阴道组织SOD的活力(P＜0.01),用药后与青年雌兔比较无明显差异(P＞0.05),其作用优于西药尼尔雌醇;②"精血归"与尼尔雌醇均有提高初老雌兔血清E2的趋势,但与空白对照组比较无统计学意义(P＞0.05);③阴道组织SOD活力与血清E2间无明显相关关系.提示以填补精血为主的中药复方制剂"精血归"能提高初老雌兔SOD的活力,从而改善其阴道的衰老状况.
