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胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜对犬血管内皮细胞的毒性
背景:前期实验利用脉冲激光沉积方法制作了胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜。
目的:进一步分析胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜的组织相容性和毒性。
方法:将传代的犬血管内皮细胞悬液接种在胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜材料上,1组置于含体积分数5%CO2、37℃恒温培养箱内静态培养3周,另1组置于含体积分数5%CO2、37℃恒温培养箱动态旋转培养3周,扫描电子显微镜下观察细胞在材料上的附着情况。采用MTT法测定血管内皮细胞与胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜材料复合培养的增殖能力。
结果与结论:动态旋转培养中见人工机械瓣膜材料的表面有细胞附着,并且数目比静态培养多,细胞分布均匀,在培养第21天可见均匀细胞融合成片,将材料表面均匀覆盖;在静态培养中细胞成堆,分布不均匀。人工机械瓣膜材料对犬血管内皮细胞增殖无明显影响,细胞生长良好。表明胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜材料对血管内皮细胞的增殖无明显影响,无明显毒性,具有良好的生物相容性。 -
体外和体内内皮化在胶原包埋羟基磷灰石涂层的人工机械瓣膜的实验研究
目的:通过体外内皮化和体内内皮化,探讨沉积胶原包埋羟基磷灰石(HA)涂层人工机械瓣膜的可行性及其在人工机械瓣膜支架体内的再细胞化能力。方法制备犬血管内皮细胞(VEC)悬液,接种在胶原包埋 HA 涂层人工机械瓣膜材料上,置培养箱内分组培养如下:①37℃孵箱中静态培养2周;②动态旋转培养装置中培养2周,比较两组 VEC 分泌一氧化氮(NO)、前列环素(PGI2)水平;再分别将人工机械瓣膜植入犬右心房,术后6周,取出部分材料,扫描电子显微镜(SEM)下观察 VEC 在 HA 材料上的附着情况,了解 HA支架材料在体内的再细胞化能力。结果与静态系统相比,人工机械瓣膜在动态旋转系统构建胶原包埋 HA 涂层 VEC分泌 NO 、PGI2水平显著升高(P <0.05);在犬右心房人工机械瓣膜取出材料中,动态旋转系统构建胶原包埋 HA 涂层VEC 层均匀分布,并有心脏内皮细胞附着,而静态培养系统中 VEC 层分布不均匀,胶原包埋 HA 涂层有心脏血管内皮细胞附着,而单纯人工机械瓣薄膜表面出现较多的血栓形成。结论动态旋转系统中构建的组织工程化瓣膜模型中, VEC 可能成为组织工程化机械瓣膜材料;胶原包埋的 HA 涂层人工机械瓣膜有利于 VEC 的黏附和生长。