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RGMb参与脑缺血再灌注损伤中大鼠海马神经元的凋亡
目的 探讨RGMb(repulsive guidance molecule b)在大鼠脑缺血再灌注损伤中对细胞凋亡的影响.方法 健康8周Wistar大鼠60只,随机分为:假手术组、缺血再灌注组、RGMb阻断组,每组依据缺血后再灌注6h、12h、24h、48h、72h不同时间点再分五个小组.采用免疫组织化学方法,Western blot方法检测Caspase-3在各组海马CA1区不同再灌注时间点的表达变化,应用TUNEL法检测海马神经元的凋亡情况.结果 缺血再灌注组Caspase-3蛋白表达量和凋亡细胞数明显高于假手术组(P<0.01),而RGMb阻断组Caspase-3蛋白表达量和凋亡细胞数明显少于缺血再灌注组(P<0.01).结论 阻断RGMb可减少脑缺血再灌注损伤中神经元的凋亡.
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脑缺血再灌注损伤后RGMb表达的变化及其对轴突生长的作用
目的 探讨大鼠脑缺血再灌注损伤后RGMb(repulsive guidance molecule b)表达的变化及RGMb在体外对轴突生长的作用.方法 ①取出生后7-9d的Wistar大鼠提取内嗅皮层(entorhinal cortex,EC)细胞,分为:正常对照组和RGMb(10 μg/ml)处理组,采用细胞培养和免疫荧光染色等方法,检测在体外培养中RGMb处理的新生大鼠EC细胞轴突长度的变化.②取正常8w的Wistar大鼠10只,随机分为:假手术组和脑缺血再灌注48h组,各5只.采用Western blot方法检测脑缺血再灌注48h后海马组织中RGMb表达的变化.结果 ①在体外培养中RGMb(10μg/ml)能抑制新生大鼠EC细胞轴突的生长.②脑缺血再灌注48h后成年大鼠海马组织中RGMb的表达明显上调.结论 脑缺血再灌注损伤后RGMb表达明显增加,提示RGMb可能参与脑缺血再灌注损伤后的神经再生障碍、炎症和细胞凋亡等病理生理过程.