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定心胶囊对房颤大鼠血小板活化的影响
目的:探讨定心胶囊对房颤大鼠血小板活化指标TXB2、PAI-I的影响,研究开发中药治疗房颤及预防房颤后血栓.方法:采用氯化钙-乙酰胆碱混合液以鼠尾静脉给药的方式建立房颤的动物模型.筛选典型房颠心电图表现的大鼠30只,随机分为AF模型组、定心胶囊治疗组、维拉帕米对照组及正常组,共4组.定心胶囊治疗组、维拉帕米对照组给药治疗4周后,测定血清中TXB2、PAI-I的含量.结果:①治疗组与模型组比较,治疗组血清中TXB2、PAI-I的含量明显降低,P均＜0.05,有统计学意义;②定心胶囊治疗组与西药对照组使房颤大鼠血清中TXB2、PAI-I的含量均降低,中药组优于西药组.结论:定心胶囊能降低血清中TXB2、PAI-I的含量,降低血小板活化,是防治房颤后血栓的有效药物.
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uPA和PAI-1基因克隆及真核表达载体的构建及鉴定
目的:克隆人卵巢上皮癌组织uPA和PAI-1基因cDNA全长,构建表达uPA和PAI-1基因的真核表达载体.方法:采用RT-PCR技术从人卵巢上皮癌组织总RNA中逆转录uPA和PAI-1基因的cDNA全长,克隆到pGEM-T Easy Vector上,通过酶切和测序进行鉴定;酶切后与真核表达载体pcDNA3.1/myc-his(-)B连接,酶切及测序再次鉴定;采用脂质体法将重组质粒DNA转染至卵巢癌上皮细胞SKOV3细胞;采用有限稀释法和G418分别加压筛选并培养SKOV3-uPA和SKOV3-PAI-1细胞及对照细胞;Western blot 法检测转染前后SKOV3细胞uPA和PAI-1基因的表达.结果:成功扩增出uPA和PAI-1基因的cDNA的全长,并克隆入T载体,DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建含正确目的基因的表达载体pcDNA3.1-uPA和pcDNA3.1-PAI-1,Western blot 能检测到uPA和PAI-1基因蛋白分别在SKOV3-uPA和SKOV3-PAI-1细胞中的表达.结论:成功构建了uPA和PAI-1表达基因的真核表达载体,为进一步研究uPA和PAI-1基因在卵巢癌侵袭转移中的作用提供了实验基础.
