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膈下逐瘀汤对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏脂肪酸代谢酶的影响
目的:观察膈下逐瘀汤对非酒精性脂肪性肝炎( NASH)大鼠肝脏脂肪酸代谢酶的影响,探讨膈下逐瘀汤防治NASH的作用机制.方法:30只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、膈下逐瘀汤组,每组10只,正常组予标准饲料喂养,其他两组予高脂饲料喂养,同时膈下逐瘀汤组予14g/( kg.d)的膈下逐瘀汤流浸膏灌胃,正常组和模型组以等容量的蒸馏水灌胃,连续12周.HE染色后光镜下观察肝脏组织病理学改变；生化法测定肝组织匀浆TG、CHOL含量；ELISA法检测血清游离脂肪酸(FAA)和肝组织脂肪酸合酶(FAS)、乙酰CoA羧化酶(ACC)、肉毒碱棕榈酸转移酶-1(CPT-1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(SCD -1)含量.结果:模型组大鼠肝组织出现重度脂肪变,肝细胞气球样变,肝小叶出现不同程度的炎细胞浸润和点片状坏死灶；肝脏NAFLD活动度积分(NAS)较正常组明显增高(P＜0.01),血清FAA和肝组织TG、CHOL含量较正常组明显增高(P＜0.01)；肝组织ACC、FAS表达较正常组显著升高(P＜0.01),而CPT-1、SCD -1蛋白表达则较正常组明显下降(P＜0.01).应用膈下逐瘀汤干预后,大鼠肝组织NAS较模型组明显下降(P＜0.05)；血清FAA、肝组织TG、CHOL水平及ACC、FAS表达均较模型组显著下降(P＜0.01,P＜0.05)；而肝组织CPT-1和SCD -1表达则较模型组明显升高(P＜0.01,P＜0.05).结论:高脂饮食诱导的NASH大鼠存在着脂肪酸代谢紊乱；膈下逐瘀汤能一定程度纠正肝组织脂肪酸代谢酶的紊乱,减少脂肪酸对肝脏损伤有关,这可能是其防治NASH的作用机制之一.
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用四环素诱导调控表达系统构建弓形虫脂肪酸合成酶FABZ缺陷株
目的 构建基于四环素诱导调控表达系统的刚地弓形虫β-酮脂酰ACP合成酶(FABZ)缺陷株. 方法 从弓形虫基因组中扩增fabz基因并构建四环素调控诱导表达载体pTetO7-Sag1-FABZ-Ty-DHFR,电穿孔法导入弓形虫TATi株,通过乙胺嘧啶抗性和极限稀释法筛选FABZ缺陷株,蛋白质印迹(Western blotting)检测虫体内附加表位标签Ty的表达.在5×105个FABZ缺陷株弓形虫速殖子培养液中加入脱水四环素(终浓度为1μg/ml),Western blotting 检测带有Ty标签的FABZ表达情况. 结果 筛选获得的缺陷株可表达带有Ty标签的转运肽型FABZ和成熟型FABZ.FABZ缺陷株弓形虫速殖子培养液中加入脱水四环素24 h和48 h后,转运肽型FABZ表达量均较对照组显著降低(P＜0.05). 结论 构建了由脱水四环素调控表达的弓形虫FABZ缺陷株.
关键词： 刚地弓形虫 脂肪酸代谢酶 四环素诱导调控表达系统 缺陷株
