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N-乙酰半胱氨酸对矽尘诱导肺泡巨噬细胞自噬影响
目的 探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383在染尘不同时间的自噬活动影响.方法 常规培养NR8383细胞,染尘3、6、12、20、24 h,并给予NAC,分别收集细胞上清液,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β Ⅰ(TGF-β Ⅰ)表达水平,自噬水平检测采用蛋白免疫印迹法和细胞免疫荧光法.结果 体外巨噬细胞染尘模型佳时间为20 h;NAC+矽尘组NR8383细胞TNF-α表达[(116.82±8.98) pg/mL]低于矽尘组[(1823.58±764.85) pg/mL](P<0.05);NAC+矽尘组NR8383细胞TGF-β Ⅰ表达[(8.27±3.62) pg/mL]与矽尘组[(14.28±5.71) pg/mL]比较差异无统计学意义(P >0.05);NAC+矽尘组与矽尘组NR8383细胞LC3蛋白表达[分别为(3.52 ±0.57)、(3.84 ±0.53) pg/mL]高于对照组[(2.24 ±0.56) pg/mL];免疫荧光结果显示,矽尘组NR8383细胞在20 h荧光信号强于对照组;NAC+矽尘组NR8383细胞荧光强度与矽尘组无明显差异.结论 矽尘刺激使NR8383细胞自噬表达增强;NAC可降低细胞上清液中TNF-α分泌水平,NAC可能参与染尘肺泡巨噬细胞的炎症反应过程.