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  • 镉相关新基因TIF3的蛋白表达与细胞转化功能研究

    作者:雷毅雄;陈家堃

    目的探讨TIF3基因在镉细胞转化和致癌过程中的重要作用.方法用细胞转染,Western blot,以及细胞转化等技术与方法,对克隆化基因TIF3的生物学功能进行研究.结果 TIF3 cDNA以pc DNA3.1/V5-His-TOPO为表达载体所转染的CHO细胞和猴肾COS1细胞均可表达分子量为36 000的TIF3编码蛋白质,而非转染和单纯载体转染的对照细胞则无此蛋白质表达;此外,TIF3 cDNA转染NIH3T3细胞可导致TIF3蛋白质超额表达,并与细胞转化密切相关.结论镉的细胞转化和致癌作用至少部分是因TIF3基因的高表达所致.

  • TIF3镉应答基因的致癌性

    作者:雷毅雄;Pius Joseph;陈家堃;Tong-man Ong

    [目的] 前期研究发现,镉相关新基因TIF3(基因文库添码:AF271072)转染NIH3T3细胞可致其编码蛋白质表达升高而引起细胞转化.本研究的目的是对TIF3基因转化NIH3T3细胞的致癌能力和致瘤性进行鉴定.[方法] 软琼脂集落形成试验和裸鼠成瘤试验.[结果] 所有4株不同的TIF3转染的NIH3T3细胞在软琼脂培养中均显示锚非依赖性生长能力,形成明显的细胞集落.而非转化对照细胞在软琼脂上则无生长能力.转化细胞和对照细胞分别给裸鼠皮下注射(每组4只),4周后所有接种转化细胞的裸鼠全部长出大小不等的肿瘤,但非转化的对照细胞于第5周后仍无1只裸鼠出现肿瘤.提示TIF3转基因转化细胞属恶性转化细胞,具有一定的致癌能力和致瘤作用.[结论] 根据本研究结果及前期发现,可以认为新发现的TIF3是一个镉应答原癌基因.

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