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  • 原位RT-PCR法定位检测柯萨奇B病毒RNA

    作者:郭淑元;郭彩玲;庄敏;谷鸿喜;张凤民;赵德超

    目的用定位检测细胞或组织中柯萨奇B病RNA的原位RT-PCR方法(直接法).方法对柯萨奇B病毒(1~6型)感染HeLa细胞,经核酸酶(DNase和RNase)处理后的病毒感染HeLa细胞以及非感染的HeLa细胞进行RT-PCR和原位RT-RCR检测.结果经原位RT-PCR扩增后,病毒感染的HeLa细胞呈蓝黑阳性信号;并且这种阳性信号经RNase A作用而消失,却不受DNase作用的影响;而非感染的HeLa细胞则不着色,其显示的结果与RT-PCR的结果一致.结论原位RT-PCR法可特异地检测柯萨奇B病毒感染HeLa细胞中的病毒RNA,是一种特异和敏感的定位检测方法,可应用于研究该病毒的持续性感染及其与克山病等相关疾病的关系.

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