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彷徨试验方法建立及其影响因素的研究
彷徨试验( fluctuation test)是Luria和Delbrück[1]为证明微生物群体中的变异株是来自由自发性突变所创造的一种方法.彷徨试验也可用于任何营养缺陷型系统,包括酵母、真菌和细菌.其方法简单而敏感,将彷徨试验与Ames试验结合,应用于致突变检测,使其灵敏度得到了很大提高.Green[2]在Ames试验的基础上将Luria和Delbruck的细菌彷徨试验(Bacterial fluctuation test)应用于致突变检测;杨逸鸿等[3]将在彷徨试验与Ames试验结合应用于致突变短期试验研究,探讨试验相关因素对检测结果影响.
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Ames试验与彷徨试验改良法对两种诱变物的对比研究
Ames试验是由美国加州大学的Ames教授和同事于1975年建立起来,是利用一组组氨酸营养缺陷型菌株加入待测物在有或没有微粒体活化系统条件下,发生回复突变的特征鉴定化学物质的诱变活性,1983年Ames等又将该方法改进,并推荐TA97、TA98、TA100和TA102等4个菌株组成的新测试菌株组[1-2].Ames试验是遗传毒性试验方法标准化并多次修订,现已成为初步筛选化学物潜在致突变的首选方法.彷徨试验(fluctuation test)是Luria和Delbruck为证明微生物群体中的变异株是来自由自发性突变所创造的一种方法[3].彷徨试验也可用于任何营养缺陷型系统,包括酵母、真菌和细菌.1976年Green在Ames试验的基础上将Luria S和Delbruck M的细菌彷徨试验(Bacterial fluctuation test)应用于致突变检测,1985年杨逸鸿等[5]将在彷徨试验与Ames试验结合应用于致突变短期试验研究,探讨试验相关因素对检测结果的影响.
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两种Ames试验方法在槲皮素致突变试验中灵敏度的研究
目的:通过传统Ames试验与改进彷徨试验对槲皮素的致突变试验结果,比较两种试验的灵敏度.方法:Ames试验方法采用平板掺入法,选择3.2、16、80、400、2000μg/mL 5个剂量组的槲皮素在有或无代谢话化条件下处理鼠伤寒沙门氏菌株TA98和TA 100 48小时后计数回复突变菌落数；改进彷徨试验采用96孔板法,选择0.128、0.64、3.2、16、80μg/mL 5个剂量组的槲皮素在有或无代谢活化条件下处理鼠伤寒沙门氏菌株TA98和TA100 24小时后计数变色孔数.结果:Ames试验结果显示槲皮素在80-2000μg/mL回复突变菌落数明显增加并超过对照2倍并有明显剂量反应关系,Ames试验结果阳性；改进彷徨试验结果显示槲皮素在0.64-80μg/mL变色孔数明显增加(P＜0.01),并有剂量反应关系,结果为阳性；而在0.64-16μg/mL剂量下,改进彷徨试验能检测出阳性结果,而Ames试验未检测出阳性结果.结论:在较低浓度时,改进彷徨试验能检测出Ames试验检测不出的阳性结果,表明改进彷徨试验灵敏度较Ames试验高.
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两种Ames试验方法在蒲葵子提取物致突变试验中灵敏度的研究
目的 通过Ames试验与彷徨试验对蒲葵子正丁醇提取物的致突变试验结果,比较两种试验的灵敏度.方法 对蒲葵子用正丁醇浸提,用Ames试验方法(掺入法)与彷徨试验方法,对TA100鼠伤寒沙门氏菌株进行致突变试验.结果 两种试验方法结果显示,蒲葵子正丁醇提取物在5～500 μg/ml剂量范围,以Ames试验方法与彷徨试验均检测出阳性结果,而在0.025 μg/ml与0.5 μg/ml剂量下,彷徨试验能检测出阳性结果,而Ames方法未检测出阳性结果.结论 在较低浓度时,彷徨试验能检测出Ames试验检测不出的阳性结果,表明彷徨试验灵敏度较Ames试验高.
