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SP对NE诱导的体外培养大鼠心肌细胞凋亡的影响及机制
目的 观察P物质(SP)对去甲肾上腺素(NE)诱导的体外培养大鼠心肌细胞凋亡的影响及机制. 方法 选用出生1-3d的SD大鼠建立新生大鼠心肌细胞体外培养模型,将12孔培养72 h的心肌细胞随机分为对照组(不加任何干预药物)、NE组、SP+ NE组、D-SP(SP的特异性受体拮抗剂)+SP+ NE组,每组n=3.以上各组中,NE、SP、D-SP终浓度分别为10-5,10-7,10-6 mol/L.药物作用3h后采用流式细胞术(FCM)测定凋亡率,采用Western blot的方法检测αB晶体蛋白(CRYAB)的含量变化,采用实时荧光定量PCR (RT-PCR)的方法检测CRYAB mRNA的变化. 结果 与对照组比较,NE组凋亡率升高,CRYAB蛋白表达和mRNA相对量均下降(P＜0.05);与NE组比较,SP+ NE组凋亡率下降,CRYAB蛋白表达与mRNA升高(P＜0.05);与SP+ NE组比较,D-SP+ SP+ NE组凋亡率升高,CRYAB蛋白表达与mRNA均下降(均P＜0.05). 结论 SP抑制NE所诱导的体外培养大鼠心肌细胞凋亡,该作用由特异性受体介导,与调控CRYAB表达实现表达水平内稳态有关.
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去甲肾上腺素对原代培养大鼠心肌细胞的凋亡率及相关蛋白的影响
目的 观察去甲肾上腺素(NE)对体外培养的原代新生大鼠心肌细胞凋亡率及相关凋亡蛋白的影响.方法 选用出生1-3 d的SD大鼠建立原代培养新生大鼠心肌细胞模型.将培养72 h的心肌细胞随机分为对照组(未使用任何药物)与不同浓度NE组(分别采用10-8,10-7,10-6,10-5,10-4 mol/L NE),每组3孔(n=3).加药后3 h采用流式细胞术测定心肌细胞凋亡率;采用Western blot检测CryAB及Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax比值的变化.结果 与对照组比较,10-8,10-7,10-6,10-5,10-4 mol/L NE作用下心肌细胞凋亡率均出现显著升高(均P<0.05);CryAB表达下降(均P<0.05),Bcl-2表达下降(除10-8 mol/L组外均P<0.05)、Bax表达升高(除10-7 mol/L组外均P<0.05),Bcl-2/Bax比值下降(均P<0.05).结论 去甲肾上腺素可能通过降低CryAB、Bcl-2表达,升高Bax表达,降低Bcl-2/Bax比值,诱导体外原代培养大鼠心肌细胞的凋亡率增加.
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慢型克山病患者血清中αB晶体蛋白表达及意义的研究
目的 了解慢型克山病患者血清中αB晶体蛋白的表达情况,探索其是否可以做为克山病生物标志物的一种.方法 选择慢型克山病患者和对照各40人.对其血清采用酶联免疫吸附法检测αB晶体蛋白(heat shock protein B5,HSPB5)、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达量,丙二醛(malondialdehyde,MDA)采用比色法测定.结果 αB晶体蛋白在病例组中的表达水平(368.51±231.61)低于对照组(486.06±289.08);NT-proBNP在病例组的表达水平(11 570.61±3 969.37)高于对照组(9 403.79±5 012.81);MDA表达量病例组(5.11±3.49)高于对照组(3.43±2.80);OPN表达量在病例组(37.53±23.10)和对照组(36.59±34.99)间无差异.结论 病例组αB晶体蛋白的表达量低于对照组;αB晶体蛋白有可能是克山病心肌损伤的一种心脏标志物.
